赤拟谷盗RNAi及dsRNA脱靶效应的研究

发布时间：2021-06-11 09:51

　　基因干扰（RNA interference,RNAi）是现代分子生物学领域的重大发现,该机制在不同进化地位的物种中高度保守。在昆虫学领域中,RNAi技术不仅为昆虫的功能基因组研究提供了便捷的方法,也为农业害虫的防治提供了新途径。然而,脱靶效应（off target effect）给RNAi技术蒙上了阴影,是目前RNAi技术应用的最大障碍。严重的脱靶效应会导致应用RNAi进行昆虫功能基因组学研究产生错误结论,如果利用RNAi进行害虫防治出现脱靶效应,就会因为靶标的非特异性而出现严重的环境安全性问题,甚至影响人类健康。因此,在应用RNAi进行害虫防控的研究中,昆虫体内脱靶效应的评估和控制是一个亟待解决的科学问题。本文以赤拟谷盗Tribolium castaneum为研究对象,通过选择合适的RNAi物质,利用微阵列芯片研究RNAi过程中脱靶效应的发生并探讨可能存在的原因,同时评估了dsRNA脱靶效应预测软件"dsCheck"的准确性,然后研究了与序列相关脱靶效应相关的dsRNA分子特征,验证了RNAi过程中非序列特异性脱靶效应的存在。相关的研究成果可以为未来dsRNA的设计以及安全控制提供理... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：160 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－１秀丽隐杆线虫中外源ＲＮＡｉ的途径（Ｆｉｓ油ｅｒ，?２０１０）??Ｆｉｇ．１－１?Ｔｈｅ?ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ?ＲＮＡｉｐａｔｈｗ巧?ｉｎ?Ｃｅ／ｅ各幻ｎｓ?（Ｆｉｓｃｈｅｒ，?２０１０）．??１．１．３?ＲＮＡｉ?

在细胞自发型ＲＮＡｉ过程中，沉默效应仅局限在ｄｓＲＮＡ引入或表达的细胞中。??ｄｓＲＮＡ被ＲＮａｓｅｌｌｌ?（Ｄｉｃｅｒ）剪切成２Ｉ－２５ｂｐ长度的ｓｉＲＮＡ，然后这些ｓｉＲＮＡ参与形??成ＲＩＳＣ结构，从而导致ｍＲＮＡ降解，详细作用机制参见图１－３。这种细胞自发型的??ＲＮＡｉ被广泛应用于研究经典的ＲＮＡｉ机制

ＭｉｎｄｅｃｅＨｓ?（?■■慰■?）Ｃ?＾?？?■?＾?）?（？ｌ｜?〇?Ｊ?）Ｃ＾?Ｏ?｜?＾）??ｆＳＳａｓｎＳｓＭ？？??图１－２不同的细胞ＲＮＡｉ示意图（Ｈｕｎｔｅｒ宗２００８）??Ｆｉｇ．?１－２?Ａ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｏｖｅｒｖｉｅｗ?ｏｆ?也ｅ?出化化！１１?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡｉ?主??１丄３．１细胞自发型ＲＮＡｉ??在细胞自发型ＲＮＡｉ过程中，沉默效应仅局限在ｄｓＲＮＡ引入或表达的细胞中。??ｄｓＲＮＡ被ＲＮａｓｅｌｌｌ?（Ｄｉｃｅｒ）剪切成２Ｉ－２５ｂｐ长度的ｓｉＲＮＡ，然后这些ｓｉＲＮＡ参与形??成ＲＩＳＣ结构，从而导致ｍＲＮＡ降解，详细作用机制参见图１－３。这种细胞自发型的??ＲＮＡｉ被广泛应用于研究经典的ＲＮＡｉ机制

【参考文献】：
期刊论文
[1]Efficiency of Different Methods for dsRNA Delivery in Cotton Bollworm（Helicoverpa armigera）[J]. YANG Jing,HAN Zhao-jun.  Journal of Integrative Agriculture. 2014(01)
[2]害虫的基因沉默控制[J]. 李飞,吴益东,韩召军.  昆虫知识. 2010(05)
[3]赤拟谷盗的综合防治[J]. 王光春.  粮油食品科技. 2007(04)
[4]RNA干扰技术的原理与应用[J]. 马鹏鹏,薛社普,韩代书.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2003(02)



本文编号：3224305