‘台绿1号’青花菜种子纯度的分子鉴定和抗青花菜猝倒病的种子包衣技术开发
发布时间：2021-06-23 09:14
随着青花菜（Brassica oleracea var.italica Planck）的栽培面积越来越广,青花菜的工厂化育苗逐渐成为主流,但是青花菜的纯度问题和猝倒病的频发制约了青花菜产业的发展,为了获得一种准确、快速鉴定青花菜纯度和缓解青花菜猝倒病现状的方法,本文通过青花菜田间调查和SSR标记对112份青花菜材料进行了杂交种的纯度鉴定,并对青花菜猝倒病进行了抗猝倒病的种子包衣开发试验,获得了以下主要研究结果:1.114对SSR引物对有28对具有多态性,共产生扩增谱带346条,平均每个引物对产生谱带12.4条。每个引物对的多态性比率在5.1%-84.6%之间,平均每个引物对的多态性比率为30.7%。2.青花菜的田间纯度鉴定结果与SSR标记结果有一定差异。根据田间鉴定,108份青花菜材料符合‘台绿1号’的典型特征,4份植株性状出现差异,田间纯度鉴定为96.43%。SSR分子标记的纯度鉴定结果表明107份青花菜的条带具有互补型条带,4份青花菜的条带不具有互补型条带,纯度为95.5%,两种鉴定结果的一致性为99.1%。3.通过常规组织分离法和核糖体DNA内转录间隔（ITS）区序列分析,发现引...
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
1 文献综述
1.1 青花菜概述
1.2 蔬菜种子纯度鉴定的方法和意义
1.2.1 蔬菜种子纯度鉴定的意义
1.2.2 种子纯度鉴定的发展
1.2.2.1 形态标记鉴定法
1.2.2.2 生化标记鉴定
1.2.2.3 分子标记鉴定法
1.3 青花菜种子的纯度鉴定
1.4 青花菜工厂化育苗
1.4.1 青花菜的工厂化育苗的定义
1.4.2 青花菜工厂化育苗的意义
1.4.3 青花菜工厂化育苗中存在的问题
1.5 种子包衣技术
1.5.1 种子包衣剂的种类及功能
1.5.1.1 种衣剂的种类
1.5.1.2 种子包衣的功能
1.5.2 种子包衣的研究概况
1.5.2.1 种子包衣在种衣剂方面的研究
1.5.2.2 种子包衣在功能性方面的研究
1.6 本试验的依据、目的及内容
2 青花菜种子的纯度鉴定
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 引物
2.1.3 方法
2.1.3.1 DNA提取
2.1.3.2 DNA提取质量检测
2.1.3.3 PCR扩增体系和反应程序
2.1.3.4 PCR扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.1.3.5 青花菜田间植株形态鉴定
2.1.3.6 青花菜F1代纯度鉴定及与田间鉴定一致性研究
2.1.3.7 SSR纯度鉴定的应用
2.2 结果与分析
2.2.1 DNA的获得及模板用量确定
2.2.1.1 DNA电泳检测结果
2.2.1.2 DNA模板用量的确定
2.2.2 引物的筛选情况
2.2.2.1 引物对扩增多态性情况
2.2.2.2 用于青花菜纯度鉴定的引物的确定
2.2.3 利用 SSR 分子标记对青花菜进行纯度鉴定的结果
2.3.1 引物对FITO008的SSR纯度鉴定结果
2.3.2 引物对FITO457的SSR纯度鉴定的结果
2.2.4 青花菜田间鉴定与SSR纯度鉴定比较
2.2.4.1 青花菜田间植株形态学分析
2.2.4.2 青花菜F1代纯度鉴定及与田间鉴定一致性分析
2.2.5 SSR纯度鉴定的应用
2.2.5.1 用引物对FITO008对萧山市提供的种子进行纯度鉴定的结果
2.2.5.2 台州市农科院提供的“台绿1号”纯度鉴定结果
2.3 讨论
2.3.1 SSR引物的多态性
2.3.2 青花菜杂交种子纯度鉴定
2.3.3 SSR分子标记在青花菜生产上的应用
2.4 结论
3 青花菜抗猝倒种子包衣
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.1.2.1 病原菌的采集和分离
3.1.2.2 病原菌致病性测定
3.1.2.3 分子生物学鉴定
3.1.2.4 青花菜种子包衣的处理
3.1.2.5 包衣青花菜种子安全性检测
3.1.2.6 杀菌剂包衣种子对青花菜苗期猝倒病的防治效果
3.2 结果与分析
3.2.1 猝倒病致病菌的获得和种子包衣处理
3.2.1.1 病原菌形态特征
3.2.2.2 病原菌的致病性
3.2.2.3 病原菌核糖体DNA-ITS区
3.2.2.4 包衣种子效果评价
3.2.2 包衣处理对青花菜种子及籽苗质量的影响
3.2.2.1 包衣处理对青花菜种子发芽率、发芽势和发芽指数的影响.353.2.2.2 包衣处理对青花菜籽苗生长的影响
3.2.2.2 包衣处理对青花菜籽苗生长的影响
3.2.2.3 基础配方包衣对青花菜种子活力的影响
3.2.3 杀菌剂包衣对猝倒病的防效效果
3.2.3.1 杀菌剂包衣对基质接种病菌情况下青花菜出苗率的影响
3.2.3.2 杀菌剂包衣对基质接种病菌情况下青花菜病苗率的影响
3.2.3.3 杀菌剂包衣对基质接种病菌情况下青花菜成苗率的影响
3.3 讨论
3.3.1 致病菌的分离和鉴定
3.3.2 种子包衣对青花菜种子质量的影响
3.3.3 杀菌剂种子包衣对青花菜的猝倒病的防效效果
3.4 结论
参考文献
个人简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]设施蔬菜苗期病害病原鉴定及化学药剂筛选[J]. 杨宇红,杨翠荣,凌键,茆振川,陈国华,谢丙炎. 中国蔬菜. 2015(06)
[2]结球甘蓝西园六号种子纯度的SSR和SRAP鉴定[J]. 袁天成,司军,宋洪元,任雪松,李成琼. 西南大学学报(自然科学版). 2014(06)
[3]11%精甲霜灵·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂防治玉米丝黑穗病试验[J]. 刘煜财,王义山,郭冬梅,王喜军,陈佳星,尚丽娟,王广祥. 吉林农业科学. 2014(03)
[4]茄子绒菌斑病病原菌鉴定及生物学特性研究[J]. 刘志恒,郑川,黄欣阳,唐爽爽,李健冰,焦俊. 植物保护. 2014(03)
[5]一种简便的南瓜杂交种纯度SSR鉴定方法[J]. 韩小霞,粟建文,胡新军,袁祖华,李勇奇,杨建国. 中国农学通报. 2014(07)
[6]青花菜海绿的选育及特征特性[J]. 顾宏辉,虞慧芳,许映君,陈纪算,汪炳良,王建升,毛培成,赵振卿,盛小光,王巍. 浙江农业科学. 2014(01)
[7]茄子杂交品种种子纯度的SSR分子标记鉴定[J]. 刘军,周晓慧,庄勇. 分子植物育种. 2013(06)
[8]黄瓜‘浙秀1号’种子纯度的SSR鉴定[J]. 周胜军,张鹏,朱育强,陈新娟,陈丽萍. 分子植物育种. 2013(05)
[9]青花菜新品种湘绿2号、湘绿3号光合特性比较[J]. 姚丹燕,吴秋云,龚意辉,黄科. 湖南农业科学. 2013(07)
[10]SSR分子标记技术在杂交棉纯度鉴定中的应用[J]. 郎需勇,吴建功,杨亮,栗晓昭,周文华,别传述. 中国棉花. 2012(09)
硕士论文
[1]番茄种子抗猝倒病包衣配方筛选、安全性评价与防效研究[D]. 何美文.浙江农林大学 2014
[2]SSR标记鉴定双低甘蓝型油菜杂交种纯度[D]. 孙方良.华中农业大学 2012
[3]大豆根腐病多种病原菌的分子检测及复合侵染规律研究[D]. 郑培娥.新疆农业大学 2012
[4]大豆尖镰孢菌的快速分子检测与遗传多样性分析及品种抗性研究[D]. 王健生.南京农业大学 2012
[5]甘蓝种质资源遗传多样性SSR标记分析和F1纯度鉴定研究[D]. 马英夏.西北农林科技大学 2012
[6]SSR标记在甘蓝遗传多样性及杂种鉴定中的应用研究[D]. 苗明军.西南大学 2010
[7]应用DNA分子标记鉴定几种蔬菜作物种子纯度和真实性的研究[D]. 张颖.浙江大学 2008
[8]种子包衣对番茄防病壮苗效果的研究[D]. 张静.西北农林科技大学 2007
[9]青花菜品种鉴定与雄性不育胞质分析[D]. 陆信娟.南京农业大学 2008
[10]甜瓜杂交种SSR指纹图谱标记和鉴定技术的研究[D]. 艾呈祥.华南热带农业大学 2005
本文编号：3244676
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
1 文献综述
1.1 青花菜概述
1.2 蔬菜种子纯度鉴定的方法和意义
1.2.1 蔬菜种子纯度鉴定的意义
1.2.2 种子纯度鉴定的发展
1.2.2.1 形态标记鉴定法
1.2.2.2 生化标记鉴定
1.2.2.3 分子标记鉴定法
1.3 青花菜种子的纯度鉴定
1.4 青花菜工厂化育苗
1.4.1 青花菜的工厂化育苗的定义
1.4.2 青花菜工厂化育苗的意义
1.4.3 青花菜工厂化育苗中存在的问题
1.5 种子包衣技术
1.5.1 种子包衣剂的种类及功能
1.5.1.1 种衣剂的种类
1.5.1.2 种子包衣的功能
1.5.2 种子包衣的研究概况
1.5.2.1 种子包衣在种衣剂方面的研究
1.5.2.2 种子包衣在功能性方面的研究
1.6 本试验的依据、目的及内容
2 青花菜种子的纯度鉴定
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 引物
2.1.3 方法
2.1.3.1 DNA提取
2.1.3.2 DNA提取质量检测
2.1.3.3 PCR扩增体系和反应程序
2.1.3.4 PCR扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.1.3.5 青花菜田间植株形态鉴定
2.1.3.6 青花菜F1代纯度鉴定及与田间鉴定一致性研究
2.1.3.7 SSR纯度鉴定的应用
2.2 结果与分析
2.2.1 DNA的获得及模板用量确定
2.2.1.1 DNA电泳检测结果
2.2.1.2 DNA模板用量的确定
2.2.2 引物的筛选情况
2.2.2.1 引物对扩增多态性情况
2.2.2.2 用于青花菜纯度鉴定的引物的确定
2.2.3 利用 SSR 分子标记对青花菜进行纯度鉴定的结果
2.3.1 引物对FITO008的SSR纯度鉴定结果
2.3.2 引物对FITO457的SSR纯度鉴定的结果
2.2.4 青花菜田间鉴定与SSR纯度鉴定比较
2.2.4.1 青花菜田间植株形态学分析
2.2.4.2 青花菜F1代纯度鉴定及与田间鉴定一致性分析
2.2.5 SSR纯度鉴定的应用
2.2.5.1 用引物对FITO008对萧山市提供的种子进行纯度鉴定的结果
2.2.5.2 台州市农科院提供的“台绿1号”纯度鉴定结果
2.3 讨论
2.3.1 SSR引物的多态性
2.3.2 青花菜杂交种子纯度鉴定
2.3.3 SSR分子标记在青花菜生产上的应用
2.4 结论
3 青花菜抗猝倒种子包衣
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.1.2.1 病原菌的采集和分离
3.1.2.2 病原菌致病性测定
3.1.2.3 分子生物学鉴定
3.1.2.4 青花菜种子包衣的处理
3.1.2.5 包衣青花菜种子安全性检测
3.1.2.6 杀菌剂包衣种子对青花菜苗期猝倒病的防治效果
3.2 结果与分析
3.2.1 猝倒病致病菌的获得和种子包衣处理
3.2.1.1 病原菌形态特征
3.2.2.2 病原菌的致病性
3.2.2.3 病原菌核糖体DNA-ITS区
3.2.2.4 包衣种子效果评价
3.2.2 包衣处理对青花菜种子及籽苗质量的影响
3.2.2.1 包衣处理对青花菜种子发芽率、发芽势和发芽指数的影响.353.2.2.2 包衣处理对青花菜籽苗生长的影响
3.2.2.2 包衣处理对青花菜籽苗生长的影响
3.2.2.3 基础配方包衣对青花菜种子活力的影响
3.2.3 杀菌剂包衣对猝倒病的防效效果
3.2.3.1 杀菌剂包衣对基质接种病菌情况下青花菜出苗率的影响
3.2.3.2 杀菌剂包衣对基质接种病菌情况下青花菜病苗率的影响
3.2.3.3 杀菌剂包衣对基质接种病菌情况下青花菜成苗率的影响
3.3 讨论
3.3.1 致病菌的分离和鉴定
3.3.2 种子包衣对青花菜种子质量的影响
3.3.3 杀菌剂种子包衣对青花菜的猝倒病的防效效果
3.4 结论
参考文献
个人简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]设施蔬菜苗期病害病原鉴定及化学药剂筛选[J]. 杨宇红,杨翠荣,凌键,茆振川,陈国华,谢丙炎. 中国蔬菜. 2015(06)
[2]结球甘蓝西园六号种子纯度的SSR和SRAP鉴定[J]. 袁天成,司军,宋洪元,任雪松,李成琼. 西南大学学报(自然科学版). 2014(06)
[3]11%精甲霜灵·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂防治玉米丝黑穗病试验[J]. 刘煜财,王义山,郭冬梅,王喜军,陈佳星,尚丽娟,王广祥. 吉林农业科学. 2014(03)
[4]茄子绒菌斑病病原菌鉴定及生物学特性研究[J]. 刘志恒,郑川,黄欣阳,唐爽爽,李健冰,焦俊. 植物保护. 2014(03)
[5]一种简便的南瓜杂交种纯度SSR鉴定方法[J]. 韩小霞,粟建文,胡新军,袁祖华,李勇奇,杨建国. 中国农学通报. 2014(07)
[6]青花菜海绿的选育及特征特性[J]. 顾宏辉,虞慧芳,许映君,陈纪算,汪炳良,王建升,毛培成,赵振卿,盛小光,王巍. 浙江农业科学. 2014(01)
[7]茄子杂交品种种子纯度的SSR分子标记鉴定[J]. 刘军,周晓慧,庄勇. 分子植物育种. 2013(06)
[8]黄瓜‘浙秀1号’种子纯度的SSR鉴定[J]. 周胜军,张鹏,朱育强,陈新娟,陈丽萍. 分子植物育种. 2013(05)
[9]青花菜新品种湘绿2号、湘绿3号光合特性比较[J]. 姚丹燕,吴秋云,龚意辉,黄科. 湖南农业科学. 2013(07)
[10]SSR分子标记技术在杂交棉纯度鉴定中的应用[J]. 郎需勇,吴建功,杨亮,栗晓昭,周文华,别传述. 中国棉花. 2012(09)
硕士论文
[1]番茄种子抗猝倒病包衣配方筛选、安全性评价与防效研究[D]. 何美文.浙江农林大学 2014
[2]SSR标记鉴定双低甘蓝型油菜杂交种纯度[D]. 孙方良.华中农业大学 2012
[3]大豆根腐病多种病原菌的分子检测及复合侵染规律研究[D]. 郑培娥.新疆农业大学 2012
[4]大豆尖镰孢菌的快速分子检测与遗传多样性分析及品种抗性研究[D]. 王健生.南京农业大学 2012
[5]甘蓝种质资源遗传多样性SSR标记分析和F1纯度鉴定研究[D]. 马英夏.西北农林科技大学 2012
[6]SSR标记在甘蓝遗传多样性及杂种鉴定中的应用研究[D]. 苗明军.西南大学 2010
[7]应用DNA分子标记鉴定几种蔬菜作物种子纯度和真实性的研究[D]. 张颖.浙江大学 2008
[8]种子包衣对番茄防病壮苗效果的研究[D]. 张静.西北农林科技大学 2007
[9]青花菜品种鉴定与雄性不育胞质分析[D]. 陆信娟.南京农业大学 2008
[10]甜瓜杂交种SSR指纹图谱标记和鉴定技术的研究[D]. 艾呈祥.华南热带农业大学 2005
本文编号：3244676
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