紫花苜蓿根际氢氧化细菌的分离鉴定及氢气对根际微生物多样性的影响

发布时间：2021-09-25 12:43

　　随着社会经济与农业的发展,满足人们高产又安全的粮食需求越来越迫切,如何促进作物增产就成为人们越来越关注的课题,根际促生菌这一概念的提出为这一问题带来了希望。氢氧化细菌属于根际促生菌,且种类繁多,数量庞杂,为了筛选并发现新的氢氧化细菌菌群,探索氢氧化细菌基本特性及促生效应,本文以陕西省铜川市耀州区紫花苜蓿根际土为研究材料开展实验。主要内容包括:利用气体循环培养体系电解水来产生H2,与通入的空气形成混合气体,调节电流大小使混合气体在装置中的流速控制在280mL/min,混合气体中H2的含量为832ppm。采用矿质盐无机培养基,即MSA培养基,在培养基中加入灭菌的土壤悬液,保证细菌的微量元素需求。在无机环境中,氢氧化细菌能够利用氢气来固定CO2获得能量,进行化能自养生长,因此利用MSA培养基分离得到100多株氢氧化细菌疑似菌株。对分离出的菌株进行TTC法和自养能力的特性检测,TTC法检测菌株氢化酶的活性,通过这两种方法筛选出16株氢化酶活性较强的氢氧化细菌:菌株1-0-19,菌株 1-1-2,菌株 1-2-3,菌株 1-2-9,菌株 1-3-2,菌株 3-0-15,菌株 2-0-4,菌株 3... 

【文章来源】：西北大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 研究背景
    1.2 紫花苜蓿的概述
    1.3 植物根际促生菌
        1.3.1 根际促生菌的概念及分类
        1.3.2 根际促生菌的促生机制
        1.3.3 植物根际促生菌的应用
    1.4 氢氧化细菌概述
        1.4.1 H_2对植物生长的影响
        1.4.2 氢氧化细菌的发现
        1.4.3 氢氧化细菌的分布
        1.4.4 氢氧化细菌的特性
        1.4.5 氢氧化细菌的分离与培养
        1.4.6 氢氧化细菌的应用
    1.5 氢氧化细菌研究现状
    1.6 土壤宏基因组学
    1.7 高通量测序技术
    1.8 高通量测序的应用
    1.9 研究内容、目的及意义
        1.9.1 研究内容
        1.9.2 研究目的
        1.9.3 研究意义
第二章 苜蓿根际氢氧化细菌的分离鉴定与促生验证
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验样品
        2.1.2 实验仪器和试剂
        2.1.3 培养基
    2.2 实验方法
        2.2.1 样品采集
        2.2.2 土壤样品中氢氧化细菌的富集与分离
        2.2.3 菌株氢化酶活性的的测定
        2.2.4 菌株自养能力的鉴定
        2.2.5 菌株的形态及生理生化鉴定
        2.2.6 16SrDNA菌种鉴定
        2.2.7 小麦促生实验验证
    2.3 结果与分析
        2.3.1 菌株氢化酶活性及自养实验结果
        2.3.2 菌株形态学鉴定结果
        2.3.3 菌株生理生化鉴定结果
        2.3.4 菌种鉴定结果
        2.3.5 小麦促生实验结果
    2.4 结论与讨论
        2.4.1 氢氧化细菌的分离与纯化
        2.4.2 氢氧化细菌的筛选与鉴定
        2.4.3 氢氧化细菌的促生验证
第三章 氢气对根际微生物群落多样性的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验样品
        3.1.2 实验试剂与仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 样品采集
        3.2.2 土壤样品的H_2处理
        3.2.3 土壤基因组DNA的提取
        3.2.4 测序分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 样品序列数的特点
        3.3.2 各样品中细菌的群落分布
        3.3.3 物种丰度热图
        3.3.4 Alpha多样性分析
        3.3.5 PCA主成分分析
        3.3.6 组间样品差异分析
    3.4 结论与讨论
第四章 问题与展望
    4.1 实验中存在的问题与改进
    4.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间取得的科研成果



本文编号：3409765