红藻硫酸多糖泡腾片及其抗食物过敏活性的研究

发布时间：2020-07-30 07:05

【摘要】：近年来,食物过敏人数持续上升,已经严重危害到过敏人群的日常生活,引起了全球范围内的广泛关注。为控制食物过敏人群的持续攀升,开发出一种安全的药物或保健品已经成为相关领域的研究热点。研究发现,海洋红藻具有多种生物活性,其中从龙须菜和紫菜中提取的龙须菜硫酸多糖和紫菜硫酸多糖具有免疫调节作用,能够预防食物过敏性疾病。泡腾片产品能够快速崩解,具有起效迅速、生物利用度高且方便携带的特点,将泡腾片应用在抗过敏领域并开发出一种功能性产品将是一个创新的选择。本文利用龙须菜硫酸多糖及紫菜硫酸多糖制备出一种红藻硫酸多糖泡腾片,并对其抗食物过敏活性进行研究。本研究通过高温压力处理结合乙醇沉淀等方法得到龙须菜硫酸多糖和紫菜硫酸多糖,总糖含量分别为97.04%、98.17%,还原糖占总糖比例分别为31.52%、25.18%,黏度分别为0.08dL/g、0.10 dL/g,硫酸根含量分别为10.16%、12.34%,红外光谱结果分析显示,两种红藻硫酸多糖均存在硫酸根活性基团。采用酸碱分开制粒的方法制备红藻硫酸多糖泡腾片,最终确定泡腾片配方(质量百分比)为:龙须菜硫酸多糖5%、紫菜硫酸多糖5%、乳糖30%、甘露醇13%、柠檬酸10%、酒石酸10%、碳酸氢钠20%、甜菊糖苷3%、聚乙烯吡咯烷酮-K30 4%。此配方下形成颗粒粒度为26.40%、休止角为23.62°,形成的片剂崩解时限为53.33 s。利用体外细胞模型评价和体内动物模型评价红藻硫酸多糖泡腾片抗食物过敏作用。体外细胞实验结果显示,红藻硫酸多糖泡腾片能够显著抑制RBL-2H3细胞脱颗粒及组胺释放。体内小鼠实验结果显示,红藻硫酸多糖泡腾片能够显著缓解小鼠过敏反应症状,显著抑制OVA特异性IgE、组胺及肥大细胞蛋白酶-1水平,显著抑制Th2型细胞因子IL-4、IL-13水平,显著促进Th1型细胞因子IFN-γ和Treg相关细胞因子IL-10、TGF-β水平。流式细胞术结果显示,红藻硫酸多糖泡腾片能够显著抑制DC细胞、Th细胞、B细胞、MC细胞的数量,并促进Treg细胞的数量。综上所述,本文成功制备了红藻硫酸多糖泡腾片,并对红藻硫酸多糖泡腾片的抗食物过敏活性及其作用机制进行了研究,可为相关片剂的开发提供参考和支持。
【学位授予单位】：集美大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TQ460.1
【图文】：

流程图,泡腾片,硫酸多糖,红藻

参照 Kawai 所用的硫酸-氯化钡方法测 GLSP(hp)和 PHSP(hp)硫酸根含量[137]。以硫标准品并设置浓度梯度，并根据添加 5%氯化钡-5%明胶时的 OD360与添加 5%明胶360的差值制作标曲，计算 GLSP(hp)和 PHSP(hp)硫酸根含量。2.2 红藻硫酸多糖泡腾片的制备与分析1）红藻硫酸多糖泡腾片的制备将所用原料分别粉碎，过 100 目筛备用。采用酸碱分开制粒法，将乳糖、甘露醇糖苷按照配方称取并充分混合，等分为两份，一份加入无水柠檬酸、酒石酸、GLS PHSP(hp)充分混合，另一份加入碳酸氢钠充分混合。用 75%的乙醇溶液溶解 PVP-K3粘合剂，分别粘合酸粉和碱粉制得两份软材，并分别过 20 目筛造粒。在 50℃鼓风内烘干 4 h，过 40 目筛整粒，得到酸粒、碱粒。将酸粒、碱粒混合均匀，经压片机到泡腾片。工艺流程见图 2-1。固定红藻硫酸多糖泡腾片中的活性成分红藻硫酸多糖含量为 GLSP(hp):PHSP(hp)=1:1）、甜味剂甜菊糖苷含量为 3%，依据泡腾片的评价指标，采素实验及正交试验对其他辅料进行筛选并确定最终配方。

示意图,休止角,示意图,物料

图 2-2 休止角测定示意图Fig. 2-1 Sketch diagram of angle of repose物料放置在恒温恒湿箱中，设置温度 25℃于称量瓶底部平铺一定量（m1）物料，精电子天平中称量吸湿后物料的重量（m2）吸湿率(%)=(m2-m1) /m1*100%得到的颗粒粒度越小越适合压片，压片后依次从上到下叠放置于水平桌面上，称取，来回晃动筛网，计算能不能通过 20 目以下方式计算粒度：粒度(%)=m1/m*100%崩解时限是泡腾片最重要的评价指标，泡

红外光谱图,红外光谱图,总糖,半乳糖

520，绘制标准曲线如图3-2，由此计算出GLSP(hp)和PHSP(hp)还原糖在其总糖中的占比分别为31.52%、25.18%。图 3-2 半乳糖标准曲线Fig. 3-2 The standard of curve of galactosey = 0.9791x + 0.0942R2 = 0.99930123450 1 2 3 4 5DO306Galactose (mg/mL)y = 0.7902x + 0.1291R2 = 0.9979012340 1 2 3 4 5DO205Galactose (mg/mL)

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