载虾青素海藻酸钙微球体外抗肝癌机制探究

发布时间：2021-12-16 18:39

　　虾青素（astaxanthin,AST）是一种抗氧化能力极强的膳食类类胡萝卜素,由于其对癌症等疾病的潜在益处而引起了科学界极大的兴趣。这种优势与虾青素分子结构中存在的大量不饱和键密切相关,然而由于这些不饱键的存在同时导致其在高温、光照、酸性条件下易被氧化,虾青素的不稳定性降低了虾青素的生物利用度。另外,与大多数类胡萝卜素相似,虾青素在水中溶解度极低。虾青素的生物局限性不仅限制了虾青素的应用,而且还限制了虾青素抗癌机制的探究。针对上述问题,本研究采用改性乳液技术制备海藻酸钙（可生物降解材料）微球作为虾青素载体,同时选取肝癌细胞（HepG2细胞株）和肝正常细胞（THLE-2细胞株）作为体外肝细胞模型,实验对比虾青素干预前后两种细胞系的细胞行为,并对其内在机制进行了探讨。本研究首先采用双乳液法制备载虾青素海藻酸钙（ACA）微球,与未包封的虾青素相比,所制备的载虾青素海藻酸钙微球具有更高的贮存稳定性和抗氧化能力,ACA微球粒径均一,平均粒径为724 nm。考虑人体吸收系统,并在ACA微球基础上探究制备载虾青素海藻酸钙/壳聚糖复合（ACAC）微球的最佳制备条件。结果表明,使用0.1%（w/v）的... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
    1.1 虾青素简介及研究现状
        1.1.1 虾青素结构及生物学功能
        1.1.2 虾青素的发展前景
        1.1.3 虾青素的应用局限
        1.1.4 虾青素的结构修饰及物理包合
    1.2 海藻酸钙及壳聚糖载药微球系统的研究现状
        1.2.1 载药微球技术简介
        1.2.2 海藻酸钠及壳聚糖的结构和性质
        1.2.3 微球的制备途径
        1.2.4 乳化凝胶法制备微球
        1.2.5 海藻酸钙/壳聚糖微球的应用
    1.3 虾青素抗癌研究进展
        1.3.1 肝癌概述
        1.3.2 肝癌恶性糖代谢概述
        1.3.3 虾青素抗癌效果研究现状
    1.4 论文的选题依据及研究内容
2.载虾青素海藻酸钙微球的制备与性能研究
    2.1 实验仪器及材料
        2.1.1 实验仪器及设备
        2.1.2 实验药品及试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 载虾青素微球的制备流程
        2.2.2 虾青素的定量检测
        2.2.3 载虾青素微球表征
        2.2.4 载虾青素微球载药量和包载率测试
        2.2.5 载虾青素微球的体外释放性能测试
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 虾青素/的定量分析
        2.3.2 载虾青素海藻酸钙微球的表征
        2.3.3 载虾青素微球载药量和包载率
        2.3.4 载虾青素海藻酸钙/壳聚糖微球体外释放性能
    2.4 小结
3 载虾青素海藻酸钙微球抗肝癌效果探究
    3.1 实验仪器与材料
        3.1.1 细胞系的选择
        3.1.2 药品与试剂
        3.1.3 试剂配制
        3.1.4 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞培养及冻存
        3.2.2 血球计数法测定细胞活性
        3.2.3 海藻酸钙微球细胞毒性测试方法
        3.2.4 载虾青素海藻酸钙微球抗肝癌测试方法
        3.2.5 细胞内活性氧含量的测定
        3.2.6 细胞凋亡检测方法
    3.3 结果与分析
        3.3.1 海藻酸钙微球细胞毒性测试结果
        3.3.2 载虾青素海藻酸钙微球抗肝癌测试结果
        3.3.3 虾青素干预后细胞内活性氧含量变化
        3.3.4 虾青素干预后细胞凋亡结果
    3.4 本章小结
4 载虾青素海藻酸钙微球抗肝癌作用机制探究
    4.1 实验材料与仪器
        4.1.1 药品与试剂
        4.1.2 实验仪器
        4.1.3 设计与合成的引物
    4.2 实验方法
        4.2.1 RNA的提取
        4.2.2 cDNA合成
        4.2.3 RT-PCR反应
    4.3 结果与分析
        4.3.1 虾青素对糖酵解过程的影响
        4.3.2 虾青素对三羧酸循环过程(TCA cycle)的影响
        4.3.3 虾青素对糖异生过程的影响
        4.3.4 虾青素对磷酸戊糖途径的影响
        4.3.5 虾青素对甘油合成途径的影响
        4.3.6 虾青素对脂肪酸和胆固醇生物合成途径的影响
    4.4 本章小结
结论
创新点与展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]雨生红球藻中虾青素的提取及稳定性研究[J]. 王红霞,杨雯,田洪,连运河,胡晓梅,武亚明.  中国食品添加剂. 2015(02)
[2]超临界CO2萃取-反相高效液相色谱测定海南对虾壳中虾青素的含量[J]. 周雪晴,冯玉红,谢艳丽,赵振东.  海南大学学报(自然科学版). 2011(01)
[3]虾青素抗氧化作用动物实验研究[J]. 杨艳,周宇红,徐海滨,张立实.  现代预防医学. 2009(13)
[4]喇蛄(大头虾)壳虾青素提取工艺研究[J]. 杜春霖.  江苏农业科学. 2009(02)
[5]虾青素的提取及其稳定性的研究[J]. 张影霞,武利刚,罗志辉,林起,段杉.  现代食品科技. 2008(12)
[6]酸法破壁条件对法夫酵母虾青素提取效果的影响[J]. 倪辉,何国庆,吴光斌,杨远帆,陈申如,蔡慧农.  农业工程学报. 2005(03)
[7]国内外虾青素的研究进展[J]. 张明祥,赵建国.  粮食与饲料工业. 2002(01)

硕士论文
[1]雨生红球藻的培养及其虾青素的提取、稳定性和应用研究[D]. 黄水英.厦门大学 2008



本文编号：3538631