β-葡聚糖诱导提高Cryptococcus podzolicus对苹果青霉病的防治效力及其机制研究

发布时间：2022-05-05 20:14

　　我国是全球最大的苹果生产国之一,然而,苹果在贮藏阶段易受病原菌侵染而腐烂。其中,扩展青霉（Penicillium expansum）引起的苹果腐烂已经造成了严重的经济损失,同时,其次级代谢产物展青霉素（patulin,PAT）对人体健康具有严重威胁。目前控制苹果真菌病害的普遍方法是使用化学杀菌剂,然而,化学杀菌剂的长期滥用给环境、人体健康带来的负面影响日益显现。多年来,研究者们积极寻找可以替代化学杀菌剂的方法,生物防治在近年来已取得了突破性的进展,并且被认为是最有希望可以替代化学杀菌剂的方法。其中,拮抗酵母更是研究的热点,然而,拮抗酵母单独使用时的防治效力仍然比不上化学杀菌剂。因此,迫切需要提高拮抗酵母的生防效力以推进其商业化应用进程。β-葡聚糖无毒无害,目前,β-葡聚糖主要用于各类食品的生产、药品加工的原料及化妆品的原料等。本论文以课题组筛选的隐球酵母（Cryptococcus podzolicus）为研究对象,通过在培养基中添加β-葡聚糖对酵母进行诱导培养,研究β-葡聚糖对C.podzolicus控制苹果采后青霉病效果的影响,从酵母生理、果实抗性等方面分析相关生理机制,并利用蛋白质... 

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 苹果采后损失现状
        1.1.1 苹果产业状况
        1.1.2 苹果主要采后病害
    1.2 苹果采后病害主要控制方法
        1.2.1 传统方法—使用化学杀菌剂
        1.2.2 非化学杀菌剂控制采后病害的探索
    1.3 拮抗酵母防治水果采后病害的机制
        1.3.1 拮抗酵母防治水果采后病害的生理机制
        1.3.2 拮抗酵母防治水果采后病害的分子机制
    1.4 增强拮抗酵母生防效力的措施
        1.4.1 与物理方法、化学物质结合使用
        1.4.2 多种拮抗菌混合使用
        1.4.3 利用分子生物技术改造生防酵母
        1.4.4 调控酵母生理
    1.5 β-葡聚糖的性质及其应用
        1.5.1 β-葡聚糖的结构与性质
        1.5.2 β-葡聚糖的应用
    1.6 本课题研究的目的及意义
第二章 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果青霉病的防治效果
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 主要仪器与设备
        2.2.2 供试水果
        2.2.3 酵母菌
        2.2.4 病原菌
        2.2.5 主要试剂及培养基
        2.2.6 不同浓度β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果采后青霉病的防治效力
        2.2.7 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果自然病害发生及贮藏品质的影响
        2.2.8 数据处理与分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 不同浓度β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果采后青霉病的防治效力
        2.3.2 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果自然病害发生及贮藏品质的影响
    2.4 讨论
第三章 β-葡聚糖诱导培养提高C.podzolicus生防效力的生理机制
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 主要仪器与设备
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 供试水果
        3.2.4 酵母菌
        3.2.5 病原菌
        3.2.6 C.podzolicus在苹果伤口处的生长动态
        3.2.7 扫描电镜观察C.podzolicus及P.expansum在苹果伤口处的生长情况
        3.2.8 β-葡聚糖诱导培养对C.podzolicus生理指标的影响
        3.2.9 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果抗病相关酶活及脂质过氧化作用的影响
    3.3 结果与分析
        3.3.1 C.podzolicus在苹果伤口处的生长动态
        3.3.2 扫描电镜观察C.podzolicus及P.expansum在苹果伤口处的生长情况
        3.3.3 β-葡聚糖诱导培养对C.podzolicusβ-1,3-葡聚糖酶活性的影响
        3.3.4 β-葡聚糖诱导培养对C.podzolicusCAT活性的影响
        3.3.5 β-葡聚糖诱导培养对C.podzolicusMDA含量的影响
        3.3.6 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果PPO活性的影响
        3.3.7 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果POD活性的影响
        3.3.8 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果PAL活性的影响
        3.3.9 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果CAT活性的影响
        3.3.10 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus对苹果脂质过氧化作用的影响
    3.4 讨论
第四章 β-葡聚糖诱导培养C.podzolicus的蛋白质组学研究
    4.1 引言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 主要仪器与设备
        4.2.2 主要试剂
        4.2.3 酵母菌
        4.2.4 总蛋白的提取
        4.2.5 双向电泳
        4.2.6 凝胶图谱分析
        4.2.7 质谱操作流程
        4.2.8 蛋白鉴定
    4.3 结果与分析
        4.3.1 C.podzolicus蛋白质双向电泳图
        4.3.2 β-葡聚糖诱导C.podzolicus差异蛋白点质谱鉴定结果
        4.3.3 差异蛋白的GO分类
    4.4 讨论
第五章 β-葡聚糖诱导C.podzolicus的转录组学研究
    5.1 引言
    5.2 材料与方法
        5.2.1 主要仪器与设备
        5.2.2 主要试剂
        5.2.3 酵母菌
        5.2.4 酵母菌总RNA的提取
        5.2.5 上机测序
        5.2.6 C.podzolicus转录组生物信息学分析
        5.2.7 RT-qPCR验证相关差异基因
    5.3 结果与分析
        5.3.1 测序质量检测及数据统计
        5.3.2 差异表达基因的GO分类
        5.3.3 差异表达基因的COG富集分析
        5.3.4 差异表达基因的KEGG注释
    5.4 RT-qPCR验证
        5.4.1 引物设计及验证
        5.4.2 差异基因验证结果与分析
    5.5 讨论
第六章 总结与展望
    6.1 主要结论
    6.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士期间学术成果



本文编号：3650941