沉香内生真菌酶对沉香白木的催化研究
发布时间：2023-03-19 20:54
目的:沉香是瑞香科植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含有树脂的木材,是一种具有悠久药用历史的传统名贵中药材。现有文献报道的主要是直接用菌株促进白木香树结香,尚未见利用沉香内生真菌产生的总酶对沉香白木直接进行催化的相关报道。本论文运用现代分离分析策略及生物技术方法,通过对沉香内生真菌的分离与纯化,以催化沉香白木最终化学成分的改变为指标,研究内生真菌对沉香白木的催化效果。方法:从沉香木中分离纯化沉香内生真菌,并发酵培养,制备总酶,用总酶对沉香白木进行催化,采用HPLC检测内生真菌产总酶对沉香白木催化后产物的变化。结果:分离纯化出21株沉香内生真菌并对其进行发酵制备总酶,各菌分别在25℃下100 r/min摇床发酵培养35 d,发酵量为24 L,结果表明,产酶最多的是YZ-8菌株,为384.257 g;最少的是BL(3)菌株,为32.906 g。运用HPLC分析总酶对沉香白木催化前后的乙醇提取物,结果表明,菌株YZ-8、YZ-9产总酶催化后,白木中的化学成分前后变化显著,另外,菌株BL3(3)1(1)、ML-1、YZ-1、YZ-3、YZ...
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
英文缩略词表
第1章 前言
1.1 沉香的概述
1.1.1 沉香提取方法
1.1.2 沉香化学成分
1.1.3 沉香内生菌
1.1.4 沉香内生菌发酵产物
1.1.5 沉香生物诱导结香
1.1.6 沉香结香机制
1.1.7 沉香药理作用
1.2 研究目的、内容及意义
1.2.1 研究目的
1.2.2 研究内容
1.2.3 研究意义
第2章 沉香内生真菌的分离纯化
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 实验样品
2.2.2 培养基
2.2.3 主要试剂与仪器
2.3 实验方法
2.3.1 沉香木块组织消毒
2.3.2 沉香内生真菌分离纯化
2.3.3 沉香内生真菌斜面保存
2.4 实验结果
2.5 本章小结
第3章 酶的制备
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 菌株
3.2.2 培养基
3.2.3 主要试剂与仪器
3.3 实验方法
3.3.1 21株内生真菌的液体发酵
3.3.2 21株内生真菌的酶制备
3.4 实验结果
3.5 本章小结
第4章 总酶对沉香白木的催化
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 菌株
4.2.2 培养基
4.2.3 实验样品
4.2.4 主要试剂与仪器
4.3 实验方法
4.3.1 总酶催化
4.3.2 催化后提取物分析
4.3.3 活性菌株总酶催化条件优化
4.3.4 菌株自身发酵
4.3.5 发酵后提取物分析
4.4 实验结果
4.4.1 催化后提取物分析
4.4.2 活性菌株总酶催化条件优化
4.4.3 发酵后提取物分析
4.5 本章小结
第5章 内生真菌对沉香白木的催化
5.1 引言
5.2 实验材料
5.2.1 菌株
5.2.2 培养基
5.2.3 主要试剂与仪器
5.3 实验方法
5.3.1 菌株活化
5.3.2 制备菌悬液
5.3.3 内生真菌催化
5.3.4 催化后提取物分析
5.4 实验结果
5.4.1 催化后提取物分析
5.5 本章小结
第6章 活性菌株的鉴定
6.1 引言
6.2 实验材料
6.2.1 菌株
6.2.2 主要试剂与仪器
6.3 实验方法
6.3.1 基因组DNA提取
6.3.2 PCR扩增
6.3.3 PCR产物测序
6.4 实验结果
6.4.1 沉香内生真菌菌株BL3③1①的鉴定
6.4.2 沉香内生真菌菌株YZ-1的鉴定
6.4.3 沉香内生真菌菌株YZ-8的鉴定
6.4.4 沉香内生真菌菌株YZ-9的鉴定
6.5 本章小结
结论与展望
参考文献
攻读硕士学位期间的研究成果、参加学术会议及获奖
致谢
本文编号：3765958
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
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中文摘要
英文摘要
英文缩略词表
第1章 前言
1.1 沉香的概述
1.1.1 沉香提取方法
1.1.2 沉香化学成分
1.1.3 沉香内生菌
1.1.4 沉香内生菌发酵产物
1.1.5 沉香生物诱导结香
1.1.6 沉香结香机制
1.1.7 沉香药理作用
1.2 研究目的、内容及意义
1.2.1 研究目的
1.2.2 研究内容
1.2.3 研究意义
第2章 沉香内生真菌的分离纯化
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 实验样品
2.2.2 培养基
2.2.3 主要试剂与仪器
2.3 实验方法
2.3.1 沉香木块组织消毒
2.3.2 沉香内生真菌分离纯化
2.3.3 沉香内生真菌斜面保存
2.4 实验结果
2.5 本章小结
第3章 酶的制备
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 菌株
3.2.2 培养基
3.2.3 主要试剂与仪器
3.3 实验方法
3.3.1 21株内生真菌的液体发酵
3.3.2 21株内生真菌的酶制备
3.4 实验结果
3.5 本章小结
第4章 总酶对沉香白木的催化
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 菌株
4.2.2 培养基
4.2.3 实验样品
4.2.4 主要试剂与仪器
4.3 实验方法
4.3.1 总酶催化
4.3.2 催化后提取物分析
4.3.3 活性菌株总酶催化条件优化
4.3.4 菌株自身发酵
4.3.5 发酵后提取物分析
4.4 实验结果
4.4.1 催化后提取物分析
4.4.2 活性菌株总酶催化条件优化
4.4.3 发酵后提取物分析
4.5 本章小结
第5章 内生真菌对沉香白木的催化
5.1 引言
5.2 实验材料
5.2.1 菌株
5.2.2 培养基
5.2.3 主要试剂与仪器
5.3 实验方法
5.3.1 菌株活化
5.3.2 制备菌悬液
5.3.3 内生真菌催化
5.3.4 催化后提取物分析
5.4 实验结果
5.4.1 催化后提取物分析
5.5 本章小结
第6章 活性菌株的鉴定
6.1 引言
6.2 实验材料
6.2.1 菌株
6.2.2 主要试剂与仪器
6.3 实验方法
6.3.1 基因组DNA提取
6.3.2 PCR扩增
6.3.3 PCR产物测序
6.4 实验结果
6.4.1 沉香内生真菌菌株BL3③1①的鉴定
6.4.2 沉香内生真菌菌株YZ-1的鉴定
6.4.3 沉香内生真菌菌株YZ-8的鉴定
6.4.4 沉香内生真菌菌株YZ-9的鉴定
6.5 本章小结
结论与展望
参考文献
攻读硕士学位期间的研究成果、参加学术会议及获奖
致谢
本文编号：3765958
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