阿维菌素高产菌株的定向选育

发布时间：2024-02-24 17:16

　　阿维菌素(Avermectins)是阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)产生的内酯类抗生素,具有广谱抑菌、低毒、易降解等特点,广泛运用于农业、畜牧业和医药等领域。阿维菌素是次级代谢产物,其复杂的代谢调控机制使得运用代谢工程手段提高阿维菌素产量极其困难。本研究首先通过物理、化学诱变建立了阿维链霉菌孢子突变文库。并建立了一种集成Qpix420微生物筛选系统、自动化移液工作站操作系统和酶标仪多孔板检测为一体的高通量筛选方法和一种基于流式细胞术的高效单细胞分选技术的高通量筛选方法。建立的筛选方法可从突变文库中快速获得高产阿维菌素突变菌株,并通过比较基因组学技术研究了高产阿维菌素突变菌株的调控机制。本文研究成果如下:(1)全波长扫描发现阿维菌素在245 nm处有特异性吸收峰且培养基无干扰。基于此特性,结合Qpix挑菌系统、自动化移液工作站操作系统和酶标仪等自动化仪器建立了一种阿维菌素高产菌株的高通量筛选方法。以阿维链霉菌ATCC 31267为出发菌株,通过常压室温等离子体(ARTP)诱变、甲基磺酸乙酯(EMS)诱变以及亚硝基胍(NTG)诱变建立了大量突变子库,获得了每种...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.3以氨基酸为前体的阿维菌素生物合成途径F19.2.3AvermeetinbiosynthesisusingPrecursoraminoaeids

F19.2.4AvermeetinBlaProduetionofdifferenteolonialmorphology2.3.2.2紫外诱变后L一lle定向选育高产阿维菌素菌株阿维菌素的生物合成途径(图2.3)说明L一异亮氨酸(L一ne)供应阿维菌素“a，，组分的2一甲基丁酞基(....

图2.3阿维链霉菌AV60s一32突变株的传代稳定性F19.2.3Thestabilityof及avermililis(AV60s一32)

F19.2.4AvermeetinBlaProduetionofdifferenteolonialmorphology2.3.2.2紫外诱变后L一lle定向选育高产阿维菌素菌株阿维菌素的生物合成途径(图2.3)说明L一异亮氨酸(L一ne)供应阿维菌素“a，，组分的2一甲基丁酞基(....

图1-1阿维菌素的化学结构

1.1阿维链霉菌及阿维菌素1.1.1阿维菌素简介阿维菌素是由阿维链霉菌发酵得到的一种广谱、低毒、高效内酯类抗生素。阿维菌素主要由八个组分构成，包括A1a、A2a、A1b、A2b、B1a、B2a、B1b和B2b，其中B1a组分抗虫能力最强[1]。作为一种生物农药，阿维菌....

图1-2阿维菌素生物合成Fig.1-2Biosynthesisofavermectin

江南大学硕士学位论文催化构成阿维菌素中C-6和C-8a间的呋喃环。C5酮基的还原由AveF催化，C5的甲基化由AveD催化，具有“A”和“B”组分的糖苷配基由此构成。AveBII-VIII催2个葡萄糖-1-磷酸成为脱氧胸甘二磷酸-齐果墩糖，脱氧胸苷二磷酸....

本文编号：3909350