产甲烷复合菌系的构建与研究
发布时间：2021-04-30 22:16
厌氧生物降解过程是一个极其复杂的过程,各种微生物活动相互作用、相互依赖、又互为制约,是一个复杂而又有序的复合体系。充分认识各种微生物在沼气发酵中的作用和影响,构建稳定﹑高效产甲烷复合菌系,对于提高沼气产气率,缩短发酵启动时间具有重要意义。也为沼气发酵菌剂的研制以及实现沼气发酵从自然发酵到可控性发酵提供支持。获得成果:（1）运用亨盖特厌氧技术从云南哀牢山﹑昆明大观河﹑厌氧消化器等生境中分离出6株产甲烷古菌。其中8-1属于产甲烷杆菌属,系统发育学分析显示其与Methanobacterium subterraneurn相似性最高,为99%。但其形态和某些生理生化特征和模式菌株有所差别,所以对其进行了形态特性和生理生化特征的进一步研究,发表论文一篇。另外5株属于甲酸甲烷杆菌属M.formicicum。（2）对采自不同生境样品的富集,驯化,得到了一系列产甲烷复合菌系,以不同方式的组配,以及刺激因子的添加,最终得到7个产气量高,pH变化稳定的高效复合菌系,并利用DGGE和荧光定量PCR技术对复合菌系进行了分析研究。复合系C1﹑C2﹑C3﹑C4﹑C5在35℃培养下19天,甲烷含量即可达到50%以上,...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言
1.1 研究背景
1.2 研究的目的和意义
1.3 国内外研究现状
1.4 研究内容与主要技术路线
1.4.1 研究内容
1.4.2 主要研究方法
1.4.3 主要技术路线
第二章 产甲烷古菌的分离、鉴定及生物学特性研究
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.2.1 实验装置
2.2.2 富集培养
2.2.3 分离纯化
2.2.4 产甲烷菌形态特征及生理生化特性鉴定
2.2.5 16S rDNA 序列扩增﹑测序及系统发育学分析
2.3 结果与讨论
2.3.1 分离的菌株
2.3.2 菌株8-1 的生物学特性研究及其系统发育学分析
2.3.3 菌株TC 的部分生物学特性研究及其系统发育学分析
第三章 产甲烷菌复合菌系的构建与DGGE 分析研究
3.1 样品准备
3.2 实验方法
3.2.1 产甲烷菌复合菌系的构建
3.2.2 应用DGGE 技术对复合菌系的分析研究
3.3 结果与分析
3.3.1 构建的菌系
3.3.2 DGGE 图谱分析
第四章 荧光定量PCR 技术对产甲烷菌复合菌系的研究
4.1 样品准备
4.2 实验方法
4.2.1 mcrA 基因片段扩增
4.2.2 TA 克隆与重组质粒提取
4.2.3 荧光定量
4.3 结果与分析
4.3.1 优化实验结果
4.3.2 标准曲线的绘制与荧光定量结果
第五章 全文结论与展望
5.1 全文总结
5.1.1 产甲烷菌的分离
5.1.2 产甲烷菌复合菌系的构建与研究
5.2 不足与展望
5.2.1 存在的不足
5.2.2 工作展望
参考文献
附录
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株生长pH较宽的产甲烷菌分离与系统发育分析[J]. 胡亚东,袁月祥,闫志英,廖银章,刘晓风,贺蓉娜,张洪森,官家发. 应用与环境生物学报. 2009(04)
[2]FISH技术及其在环境微生物监测中的应用[J]. 李冰冰,肖波,李蓓. 生物技术. 2007(05)
[3]嗜冷产甲烷菌及其在废水厌氧处理中的应用[J]. 左剑恶,邢薇. 应用生态学报. 2007(09)
[4]PCR-DGGE技术在农村户用沼气发酵微生物研究中的初步应用[J]. 师晓爽,刘德立,郎志宏,黄大昉,陆伟,李敏. 山东师范大学学报(自然科学版). 2007(02)
[5]DNA提取方法对活性污泥微生物多样性PCR-DGGE检测的影响[J]. 李鹏,毕学军,汝少国. 安全与环境学报. 2007(02)
[6]T-RFLP技术分析油藏微生物多样性[J]. 袁三青,薛燕芬,高鹏,汪卫东,马延和,李希明,许国旺. 微生物学报. 2007(02)
[7]利用FISH和DGGE对产甲烷颗粒污泥中微生物种群的研究[J]. 邢薇,左剑恶,孙寓姣,李建平. 环境科学. 2006(11)
[8]瘤胃微生物总DNA提取方法的比较[J]. 李旦,杨舒黎,罗淑萍,王加启. 中国农学通报. 2006(09)
[9]硫酸盐还原菌的分离与生态特点研究[J]. 杨建设,黄玉堂,吴楚施,蔡晓宜. 水土保持研究. 2006(04)
[10]应用DGGE研究微生物群落时的常见问题分析[J]. 邢德峰,任南琪. 微生物学报. 2006(02)
本文编号：3169582
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言
1.1 研究背景
1.2 研究的目的和意义
1.3 国内外研究现状
1.4 研究内容与主要技术路线
1.4.1 研究内容
1.4.2 主要研究方法
1.4.3 主要技术路线
第二章 产甲烷古菌的分离、鉴定及生物学特性研究
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.2.1 实验装置
2.2.2 富集培养
2.2.3 分离纯化
2.2.4 产甲烷菌形态特征及生理生化特性鉴定
2.2.5 16S rDNA 序列扩增﹑测序及系统发育学分析
2.3 结果与讨论
2.3.1 分离的菌株
2.3.2 菌株8-1 的生物学特性研究及其系统发育学分析
2.3.3 菌株TC 的部分生物学特性研究及其系统发育学分析
第三章 产甲烷菌复合菌系的构建与DGGE 分析研究
3.1 样品准备
3.2 实验方法
3.2.1 产甲烷菌复合菌系的构建
3.2.2 应用DGGE 技术对复合菌系的分析研究
3.3 结果与分析
3.3.1 构建的菌系
3.3.2 DGGE 图谱分析
第四章 荧光定量PCR 技术对产甲烷菌复合菌系的研究
4.1 样品准备
4.2 实验方法
4.2.1 mcrA 基因片段扩增
4.2.2 TA 克隆与重组质粒提取
4.2.3 荧光定量
4.3 结果与分析
4.3.1 优化实验结果
4.3.2 标准曲线的绘制与荧光定量结果
第五章 全文结论与展望
5.1 全文总结
5.1.1 产甲烷菌的分离
5.1.2 产甲烷菌复合菌系的构建与研究
5.2 不足与展望
5.2.1 存在的不足
5.2.2 工作展望
参考文献
附录
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株生长pH较宽的产甲烷菌分离与系统发育分析[J]. 胡亚东,袁月祥,闫志英,廖银章,刘晓风,贺蓉娜,张洪森,官家发. 应用与环境生物学报. 2009(04)
[2]FISH技术及其在环境微生物监测中的应用[J]. 李冰冰,肖波,李蓓. 生物技术. 2007(05)
[3]嗜冷产甲烷菌及其在废水厌氧处理中的应用[J]. 左剑恶,邢薇. 应用生态学报. 2007(09)
[4]PCR-DGGE技术在农村户用沼气发酵微生物研究中的初步应用[J]. 师晓爽,刘德立,郎志宏,黄大昉,陆伟,李敏. 山东师范大学学报(自然科学版). 2007(02)
[5]DNA提取方法对活性污泥微生物多样性PCR-DGGE检测的影响[J]. 李鹏,毕学军,汝少国. 安全与环境学报. 2007(02)
[6]T-RFLP技术分析油藏微生物多样性[J]. 袁三青,薛燕芬,高鹏,汪卫东,马延和,李希明,许国旺. 微生物学报. 2007(02)
[7]利用FISH和DGGE对产甲烷颗粒污泥中微生物种群的研究[J]. 邢薇,左剑恶,孙寓姣,李建平. 环境科学. 2006(11)
[8]瘤胃微生物总DNA提取方法的比较[J]. 李旦,杨舒黎,罗淑萍,王加启. 中国农学通报. 2006(09)
[9]硫酸盐还原菌的分离与生态特点研究[J]. 杨建设,黄玉堂,吴楚施,蔡晓宜. 水土保持研究. 2006(04)
[10]应用DGGE研究微生物群落时的常见问题分析[J]. 邢德峰,任南琪. 微生物学报. 2006(02)
本文编号：3169582
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