高效纤维素降解复合菌剂的筛选及在秸秆沼气发酵中的应用

发布时间：2021-09-18 06:12

　　纤维素是地球上资源最丰富、来源最广泛的有机物质。由于缺乏相关技术等诸多因素,纤维素这一类宝贵资源不仅未能得到充分利用,而且还有相当大的一部分被废弃,成为环境污染物之一,这样既造成了资源浪费又对生态环境造成了严重的破坏。将秸秆作为沼气发酵的原料,不但可以变废为宝还可以在一定程度上解决农村能源不足的问题。然而秸秆在沼气发酵过程中表现出的发酵启动慢、原料利用不充分等问题由来已久,利用微生物对秸秆进行预处理来解决上述问题是最根本的途径,筛选出高效纤维素降解菌株,并构建适用于秸秆沼气发酵预处理阶段的复合菌剂具有重要意义。本研究从牛粪与稻草堆腐物、腐熟的猪粪、菌渣、土壤及枯枝落叶、垃圾堆腐物等6种不同材料分离出纤维素降解菌194株,其中有细菌79株,放线菌53株,真菌62株。通过纤维素刚果红培养基测定其生长速度与水解圈大小,以及测定滤纸崩解率,并剔除有拮抗作用的菌株后,复筛出高效纤维素降解菌15株。将筛选出的15株高效纤维素降解菌进行正交试验,结果有5个组合表现出较高的酶活性,CMC酶活力大小依次为：组合16>组合10>组合13>组合2>组合11。其中,通过对组合16的一系... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

葡萄糖标准曲线

3.4.1培养起始pH对复合系产酶的影响将液体发酵培养基的起始pH分别调到5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，在30oC，120r/min恒温振荡培养箱内培养4天后，测定CMC酶活，结果见图3一1。由图可知，pH为6.5时复合系产生的酶活最大，在pHS.5一pHS.o范围内，CMC酶活变化较大，在 pHS.5~PH6.5范围内呈上升趋势，pH6.5一pHS.o范围内呈下降趋势，且在弱酸性条件下产酶能力大于中性及弱碱性条件。一今一CMC酶活n甘 nnUCUCUnCUU︸nU曰八︸只︸匕左八01山nU︵X八bd工9口︵fl︶避鹅O一 5.566.577.58PH图3一1不同pH对复合系产酶的影响Fig.3一 1CellulaseactivitiesofeellulosedegradingmieroorganismsgrownatdifferentPH3.4.2培养温度对复合系产酶的影响将复合系菌株接种于装有10OmL液体发酵培养基的250mL三角瓶中，将三角瓶分别置于25℃、30℃、35℃、40℃、45℃下

将复合系菌株接种于装有IOOmL液体发酵培养基的250mL三角瓶中，将三角瓶置于恒温振荡器内连续培养，培养温度设为30℃、转速设为120r/min，同时，每24h测定一次CMC酶活，结果如图3一3。由图可知，培养第2天到第5天该复合系产酶均处于较高水平，第4天时CMC酶活达到最大值巧0.26，超过第5天，酶活力呈下降趋势。一刁.一一CMC酶活n︺n︸﹄日﹃UC划n以nU 649﹄n曰R户 0A工︵己誉华4日寸间(d)图3一3不同培养时间对菌株复合系产酶的影响 F19.3一 3Cellulaseaetivitiesofeellulosedegradingmicroorganismseulturedfordifferenttime3.4.4碳源对复合系产酶的影响将复合系菌株接种于装有IOOmL液体发酵培养基的25OmL三角瓶中，液体培养基中加入不同的0.5%可溶性碳源或1%不可溶性碳源，并置于恒温振荡器内培养4d


本文编号：3399627