以菊芋为原料的酒精发酵研究
发布时间：2023-04-22 15:38
本实验选用多种不同的培养基,经过广泛的初筛、复筛,得到了14株产菊粉酶的微生物菌种,其中酶活力最高的菌株为B02,其I(内切酶)、S(外切酶)值分别为:4.34U·mL-1,5.97U·mL-1。经过对其平板菌落形态的观察以及显微观察等将B02初步鉴定为青霉属菌株。 为了获得一株能够直接利用菊芋来进行酒精发酵的融合菌株,选择适宜的原生质体制备与融合条件,将自行筛选所得的一株高产菊粉酶的青霉菌B02与酿酒酵母进行原生质体融合,将菊粉酶基因引入酿酒酵母,使杂交后代具有直接利用菊粉制造酒精的能力,经选择性检出融合子,对其产酶能力、产酒精能力进行测定,进而对其遗传稳定性进行研究,最终筛选出一株各项性能较优的融合菌株R8。酒精发酵试验结果显示,其产菊粉酶能力为:I:8.79,S:25.09,发酵菊粉的酒精得率为41.16%,原料糖分利用率为75.52%,酒精含量为31.6g·L-1。 将试验筛选出的融合菌株R8进行酒精发酵条件优化,经过6个单因素试验和正交试验,得到的优化条件为:160g·L-1JAE(菊芋提...
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 菊粉
1.1.1 菊粉的生理功能
1.1.2 菊粉的炼制
1.1.3 菊粉的生物转化
1.2 菊粉酶
1.2.1 菊粉酶分类
1.2.2 菊粉酶来源
1.2.3 影响微生物合成菊粉酶的因素
1.2.4 菊粉酶的应用
1.2.5 菊粉酶的研究
1.3 原生质体融合技术
1.3.1 原生质体融合技术的原理
1.3.2 原生质体融合技术的研究进展
1.3.3 原生质体融合技术在酿酒酵母育种上的应用
1.3.4 原生质体融合技术的应用前景及存在问题
1.4 以菊芋为原料的酒精发酵研究现状
1.4.1 先糖化后发酵技术与同步糖化发酵技术
1.4.2 固定化细胞连续发酵技术
1.5 响应面优化法
1.6 本课题立题意义和研究的主要内容
第2章 产菊粉酶菌株的筛选
2.1 试验材料
2.1.1 样品来源
2.1.2 筛选培养基
2.1.3 试剂
2.1.4 仪器
2.2 试验方法
2.2.1 筛选实验
2.2.2 粗酶液的制备
2.2.3 酶活的测定
2.3 结果与讨论
2.3.1 筛选结果
2.3.2 果糖标准曲线的绘制
2.3.3 酶活测定结果
2.3.4 菌种鉴定
2.4 结论
第3章 原生质体融合
3.1 试验材料
3.1.1 菌种
3.1.2 培养基
3.1.3 试剂
3.1.4 仪器
3.2 试验方法
3.2.1 菌种活化与扩大培养
3.2.2 离心洗涤、收集细胞
3.2.3 原生质体制备
3.2.4 原生质体再生
3.2.5 酵母菌原生质体形成率和再生率的测定
3.2.6 原生质体融合
3.2.7 融合子的鉴定
3.3 结果与讨论
3.3.1 原生质体制备条件的选择
3.3.2 酵母菌原生质体形成率和再生率的测定
3.3.3 原生质体的融合及融合子的检出
3.3.4 融合子性能测定及筛选
3.4 结论
第4章 酒精发酵研究
4.1 试验材料
4.1.1 菌种
4.1.2 培养基
4.1.3 试剂
4.1.4 仪器
4.2 试验方法
4.2.1 培养条件
4.2.2 单因素试验
4.2.3 正交试验设计
4.2.4 响应面分析试验设计
4.2.5 分析方法
4.3 结果与讨论
4.3.1 JAE 总糖测定
4.3.2 单因子实验结果
4.3.3 正交试验结果
4.3.4 R8 发酵条件优化验证试验
4.3.5 响应面分析
4.4 结论
结论
参考文献
致谢
附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录
本文编号：3797925
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【学位级别】：硕士
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摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 菊粉
1.1.1 菊粉的生理功能
1.1.2 菊粉的炼制
1.1.3 菊粉的生物转化
1.2 菊粉酶
1.2.1 菊粉酶分类
1.2.2 菊粉酶来源
1.2.3 影响微生物合成菊粉酶的因素
1.2.4 菊粉酶的应用
1.2.5 菊粉酶的研究
1.3 原生质体融合技术
1.3.1 原生质体融合技术的原理
1.3.2 原生质体融合技术的研究进展
1.3.3 原生质体融合技术在酿酒酵母育种上的应用
1.3.4 原生质体融合技术的应用前景及存在问题
1.4 以菊芋为原料的酒精发酵研究现状
1.4.1 先糖化后发酵技术与同步糖化发酵技术
1.4.2 固定化细胞连续发酵技术
1.5 响应面优化法
1.6 本课题立题意义和研究的主要内容
第2章 产菊粉酶菌株的筛选
2.1 试验材料
2.1.1 样品来源
2.1.2 筛选培养基
2.1.3 试剂
2.1.4 仪器
2.2 试验方法
2.2.1 筛选实验
2.2.2 粗酶液的制备
2.2.3 酶活的测定
2.3 结果与讨论
2.3.1 筛选结果
2.3.2 果糖标准曲线的绘制
2.3.3 酶活测定结果
2.3.4 菌种鉴定
2.4 结论
第3章 原生质体融合
3.1 试验材料
3.1.1 菌种
3.1.2 培养基
3.1.3 试剂
3.1.4 仪器
3.2 试验方法
3.2.1 菌种活化与扩大培养
3.2.2 离心洗涤、收集细胞
3.2.3 原生质体制备
3.2.4 原生质体再生
3.2.5 酵母菌原生质体形成率和再生率的测定
3.2.6 原生质体融合
3.2.7 融合子的鉴定
3.3 结果与讨论
3.3.1 原生质体制备条件的选择
3.3.2 酵母菌原生质体形成率和再生率的测定
3.3.3 原生质体的融合及融合子的检出
3.3.4 融合子性能测定及筛选
3.4 结论
第4章 酒精发酵研究
4.1 试验材料
4.1.1 菌种
4.1.2 培养基
4.1.3 试剂
4.1.4 仪器
4.2 试验方法
4.2.1 培养条件
4.2.2 单因素试验
4.2.3 正交试验设计
4.2.4 响应面分析试验设计
4.2.5 分析方法
4.3 结果与讨论
4.3.1 JAE 总糖测定
4.3.2 单因子实验结果
4.3.3 正交试验结果
4.3.4 R8 发酵条件优化验证试验
4.3.5 响应面分析
4.4 结论
结论
参考文献
致谢
附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录
本文编号：3797925
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