青海省高寒草地青藏苔草根围土壤细菌拮抗功能评价及鉴定

发布时间：2021-12-10 19:35

　　从青海高寒草地青藏苔草根围土壤样品中分离到8株菌株,其中1T5在28℃下经几次转接后不能生长,将其他7株细菌进行了拮抗功能评价及鉴定。结果表明:7株菌株中,只有1T4和1T8对指示菌有良好的抑菌作用,占分离总株数的25%,抑菌率在54.3%～75.7%,其中1T4对番茄早疫病菌（Alternaria solani）、马铃薯坏疽病菌（Phoma foveata）、马铃薯炭疽病菌（Colletotrichum coccodes）和马铃薯枯萎病菌（Fusarium avenaceum）的抑菌率分别为67.1%、61.4%、75.7%和69.2%;1T8对番茄早疫病菌及马铃薯坏疽病菌的抑菌率分别为65.7%和54.3%,对马铃薯炭疽病菌和马铃薯枯萎病菌没有抑菌作用;1T1、1T2、1T3、1T6和1T7对4种指示菌均没有拮抗作用;根据培养性状和形态特征,结合16S rDNA基因序列分析,将1T4鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）,1T8鉴定为腐生葡萄球菌（Staphylococcus saprophyticus）。 

【文章来源】：草原与草坪. 2019,39(01)CSCD

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【部分图文】：

图１土壤细菌菌落形态Ｆｉｇ．１Ｔｈｅｃｏｎｏｌｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｓｏｉｌｂａｃｔｅｒｉａ

图１土壤细菌菌落形态Ｆｉｇ．１Ｔｈｅｃｏｎｏｌｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｓｏｉｌｂａｃｔｅｒｉａ图２土壤细菌的革兰氏染色Ｆｉｇ．２Ｔｈｅｇｒａｍｓｔａｉｎｓｏｆｓｏｉｌｂａｃｔｅｒｉａ２．３拮抗功能评价结果表明，土壤细菌１Ｔ４对供试病原真菌均有拮抗作用，１Ｔ８对番茄早疫病菌和马铃薯坏疽病菌有拮抗作用（图３，４），其中１Ｔ４和１Ｔ８对番茄早疫病菌的抑菌率分别为６７．１％和６５．７％，对马铃薯坏疽病菌的抑菌率分别为６１．４％和５４．３％；１Ｔ４对马铃薯枯萎病菌和马铃薯炭疽病的抑菌率分别为６２．９％和７５．７％；１Ｔ１、１Ｔ２、１Ｔ３、１Ｔ６和１Ｔ７对４种指示菌没有拮抗作用（表２）。表２７株土壤细菌对４种病原菌的抑菌率Ｔａｂｌｅ２Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｒａｔｉｏｏｆｓｏｉｌｂａｃｔｅｒｉａａｇａｉｎｓｔｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｆｕｎｇｉ％菌株抑菌率／％１Ｔ１１Ｔ２１Ｔ３１Ｔ４１Ｔ６１Ｔ７１Ｔ８番茄早疫病菌０００６７．１００６５．７马铃薯坏疽病菌０００６１．４００５４．３马铃薯枯萎病菌０００６９．２０００马铃薯炭疽病菌０００７５．７０００第３９卷第１期草原与草坪２０１９年１７

图３１Ｔ４和１Ｔ８对番茄早疫病菌的拮抗作用Ｆｉｇ．３Ｔｈｅａｎｔａｇｏｎｉｓｍｏｆ１Ｔ４ａｎｄ１Ｔ８ａｇａｉｎｓｔＡｌｔｅｒｎａｒｉａｓｏｌａｎｉ图４１Ｔ４和１Ｔ８对马铃薯坏疽病菌的拮抗作用Ｆｉｇ．４Ｔｈｅａｎｔａｇｏｎｉｓｍｏｆ１Ｔ４ａｎｄ１Ｔ８ａｇａｉｎｓｔＰｈｏｍａｆｏｖｅａｔａ２．４１６ＳｒＤＮＡ序列鉴定采用细菌１６ＳｒＤＮＡ通用引物，对有抑菌作用的细菌进行ＰＣＲ扩增，并将细菌扩增结果送至武汉金开瑞生物工程有限公司进行测序，测序结果与ＧｅｎＢａｎｋ数据库进行Ｂｌａｓｔ对比，选择与对比菌株同源性大于９９％的菌株，使用ＭＡＧＥ７软件构建系统发育树。结果显示，在系统发育树中１Ｔ１与Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｏｒｒｕ－ｇａｔａ（ＭＦ０７７２０３．１）的同源性达１００％，且聚于同一分支上（图６），结合形态特征将１Ｔ１初步鉴定为Ｐｓｅｕｄ－ｏｍｏｎａｓｃｏｒｒｕｇａｔａ；１Ｔ３与Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｂｒａｓｓｉ－ｃａｃｅａｒｕｍ（ＫＸ９８４０４５．１）的同源性达９９％，且聚为一类，初步鉴定为Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｒｕｍ；１Ｔ４与解淀粉芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ的两个菌株ＭＧ９３７５７２．１和ＫＹ２７１７５２．１的同源性达９９％，且聚为一类，初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ；１Ｔ２，１Ｔ６和１Ｔ８与腐生葡萄球菌图５青藏苔草根围土壤细菌系统发育树Ｆｉｇ．５１６ＳｒＤＮＡｐｈｙｌｏｇｅｎ

【参考文献】：
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本文编号：3533263