鞘氨醇单胞菌GY2B降解菲过程中细胞表面性质及其活性的变化

发布时间：2023-02-09 11:15

　　多环芳烃(PAHs)作为环境中的典型持久性有机有毒污染物，对生态环境和人体健康危害极大，因而其修复治理研究引起了人们的关注。微生物降解具有处理形式多样、成本低、对环境影响小等优点，是去除环境中PAHs的主要途径，但目前的微生物降解研究更多集中在污染物降解效率和细胞增殖等方面，只是从宏观的角度了解降解过程中整个系统的状况，无法反映降解过程中微生物个体细胞的变化特征。然而，微生物个体细胞的生理状态、代谢功能及繁殖能力，对于污染物降解过程的效果有着重要的意义，可对修复效果起到决定性的作用。因此，对降解过程中细菌个体细胞的状态进行研究能更好地了解微生物的降解机制，从而充分发挥微生物的降解能力。 为此，本研究尝试结合流式细胞术与荧光染料检测高效菲降解菌GY2B（Sphingomonas sp. GY2B）降解菲过程中膜性质、细菌活性、生长状态等方面的变化，同时结合傅里叶红外光谱及Zeta电位检测分析技术等，探究不同的底物条件以及菲的降解产物对其降解菌GY2B个体细胞性质的影响，以了解降解过程中污染物对降解菌的影响，为更好地进行污染环境的微生物修复提供理论依据。主要研究结果如下： 1）流式细胞仪结...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 多环芳烃简介
        1.1.1 PAHs 的理化结构和性质
        1.1.2 PAHs 的产生和来源
        1.1.3 PAHs 的危害
    1.2 多环芳烃污染的生物修复技术
        1.2.1 常用生物修复
        1.2.2 单细胞分析技术
    1.3 流式细胞术
        1.3.1 流式细胞术的原理
        1.3.2 流式细胞术的应用
    1.4 研究意义、目的及研究内容
        1.4.1 研究意义及目的
        1.4.2 研究内容
第二章 实验材料与方法
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 化学试剂及实验所需溶液的配制
        2.1.3 实验器皿及使用仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株 GY2B 对菲的降解实验
        2.2.2 菌体膜通透性（membrane permeability）的测定
        2.2.3 菌体完整、受损和死亡细胞的区分
        2.2.4 傅里叶红外光谱检测
        2.2.5 菌体表面 Zeta 电位的测定
        2.2.6 菲及中间代谢产物浓度检测
第三章 检测方法建立
    3.1 PI 和流式细胞术结合检测细胞膜方法的建立
    3.2 SYTO9/PI 双染法区分死亡、受损及完整的细菌细胞
第四章 底物条件对鞘氨醇单胞菌 GY2B 性质的影响
    4.1 不同底物条件下 GY2B 性质的变化
        4.1.1 不同底物条件下 GY2B 菌膜通透性变化
        4.1.2 营养肉汤条件下 GY2B 菌膜表面官能团变化
        4.1.3 营养肉汤条件下 GY2B 菌活性的变化
    4.2 不同菲浓度条件下 GY2B 性质的变化
        4.2.1 不同浓度菲条件下 GY2B 膜完整性的变化
        4.2.2 不同浓度菲条件下 GY2B 菌表面 Zeta 电位的变化
        4.2.3 不同浓度菲条件下 GY2B 菌膜表面官能团变化
        4.2.4 不同浓度菲条件下 GY2B 菌活性特征
    4.3 本章小结
第五章 降解过程中间产物对鞘氨醇单胞菌 GY2B 性质的影响
    5.1 GY2B 菌降解途径分析
    5.2 低浓度降解产物对 GY2B 的作用
        5.2.1 降解过程中代谢产物浓度变化
        5.2.2 低浓度降解产物条件下 GY2B 菌的活性
    5.3 高浓度降解产物对 GY2B 的作用
        5.3.1 降解过程中代谢产物浓度变化
        5.3.2 高浓度降解产物条件下 GY2B 菌的活性
    5.4 本章小结
结论与展望
    1 研究结论
    2 展望
参考文献
攻读硕士学位期间取得的研究成果
致谢
附件



本文编号：3738764