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环境中痕量溴系阻燃剂的新型免疫分析方法的研究

发布时间:2023-02-09 19:03
  溴系阻燃剂(BFRs)是目前阻燃效率最高的有机阻燃剂之一,能够满足于多种阻燃产品的使用要求。多溴联苯醚(PBDEs)属于溴系阻燃剂的一种,因其阻燃效率高,热稳定性好而被广泛应用于聚合物的生产中。其中,2,4,4’-三溴联苯醚(BDE-28)与2,2’,4,4’-四溴联苯醚(BDE-47)均为检出率较高的PBDEs同系物,具有很强的生物毒性。四溴双酚A(TBBPA)是一种常用的工业溴系阻燃剂,常因高温或其他理化因子的影响而释放到环境介质中。目前,BFRs的检测方法以气相或液相色谱为主,这类色谱检测技术具有较高的稳定性和准确度,但其检测周期长,样品前处理过程复杂且仪器的维护费用昂贵。因此,建立高灵敏度、高通量、方便快捷的免疫分析方法检测痕量BFRs在环境监测研究领域具有重要的科学意义和应用价值。本论文分别以BDE-28、BDE-47和TBBPA三种检出率较高的BFRs作为研究对象,利用BDE-28、BDE-47和TBBPA人工抗原及多克隆抗体,建立了三种新型免疫分析方法,并分别应用于环境样品的检测。对于建立高灵敏度、快速便捷的免疫分析方法检测痕量BFRs具有一定的参考作用。具体研究结果分别...

【文章页数】:143 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 溴系阻燃剂的概述
        1.1.1 多溴联苯醚简介
        1.1.2 2 ,4,4’-三溴联苯醚
        1.1.3 2 ,2’,4,4’-四溴联苯醚
        1.1.4 多溴联苯醚的污染状况
        1.1.5 四溴双酚A简介
        1.1.6 四溴双酚A的污染状况
    1.2 BFRs的检测方法
        1.2.1 多溴联苯醚的检测方法
        1.2.2 四溴双酚A的检测方法
    1.3 免疫分析技术
        1.3.1 常用的免疫分析方法
        1.3.2 实时荧光定量免疫PCR技术
    1.4 研究目的及意义
    1.5 研究内容与技术路线
        1.5.1 研究内容
        1.5.2 技术路线
第二章 2,4,4’-三溴联苯醚人工抗原、抗体的制备
    2.1 引言
    2.2 实验仪器与试剂
        2.2.1 实验仪器
        2.2.2 实验试剂
        2.2.3 实验试剂的配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 BDE-28 半抗原的制备及表征
        2.3.2 BDE-28 人工全抗原的制备
        2.3.3 BDE-28 抗原的鉴定与表征
        2.3.4 BDE-28 抗原蛋白质浓度的测定
        2.3.5 偶联物结合比的计算
        2.3.6 BDE-28 多克隆抗体的制备
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 BDE-28 半抗原的红外光谱和核磁共振氢谱表征
        2.4.2 BDE-28抗原的鉴定
        2.4.3 BDE-28抗原的浓度与偶联比
        2.4.4 抗血清效价的测定
        2.4.5 BDE-28抗体的蛋白含量及效价
        2.4.6 BDE-28抗体的特异性
        2.4.7 BDE-28抗体的亲和性
    2.5 本章小结
第三章 间接竞争GNPs-BA-ELISA检测TBBPA方法的建立及应用
    3.1 引言
    3.2 实验仪器与试剂
        3.2.1 实验仪器
        3.2.2 实验试剂
        3.2.3 实验试剂的配制
    3.3 实验方法
        3.3.1 生物素-羊抗兔IgG-GNPs复合物的制备
        3.3.2 间接竞争GNPs-BA-ELISA方法的建立
        3.3.3 反应条件的优化
        3.3.4 GNPs-BA-ELISA方法标准曲线的建立
        3.3.5 GNPs-BA-ELISA方法的重复性
        3.3.6 环境样品的采集与预处理
        3.3.7 TBBPA样品的检测
        3.3.8 方法的回收率检测
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 GNPs和生物素-羊抗兔IgG-GNPs复合物的表征
        3.4.2 反应条件的优化结果
        3.4.3 GNPs-BA-ELISA方法的标准曲线
        3.4.4 GNPs-BA-ELISA方法的重复性
        3.4.5 环境样品中TBBPA的检测
        3.4.6 方法的回收率
        3.4.7 与BA-ELISA方法的比较
    3.5 本章小结
第四章 间接竞争GO-BA-iPCR检测PBDEs方法的建立及应用
    4.1 引言
    4.2 实验仪器与试剂
        4.2.1 实验仪器
        4.2.2 实验试剂
        4.2.3 实验试剂的配制
    4.3 实验方法
        4.3.1 生物素化DNA
        4.3.2 功能化氧化石墨烯复合物的制备
        4.3.3 间接竞争GO-BA-iPCR方法的建立
        4.3.4 反应条件的优化
        4.3.5 GO-BA-iPCR方法标准曲线的建立
        4.3.6 GO-BA-iPCR方法的重复性
        4.3.7 PM2.5样品预处理及检测
        4.3.8 方法的回收率检测
    4.4 结果与结论
        4.4.1 GO和生物素-羊抗兔IgG-GO复合物的表征
        4.4.2 反应条件的优化结果
        4.4.3 GO-BA-iPCR方法的标准曲线
        4.4.4 GO-BA-iPCR方法的重复性
        4.4.5 PM2.5样品的检测
        4.4.6 方法的回收率
    4.5 本章小结
第五章 直接竞争GNPs-iPCR检测PBDEs方法的建立及应用
    5.1 引言
    5.2 实验仪器与试剂
        5.2.1 实验仪器
        5.2.2 实验试剂
        5.2.3 实验试剂的配制
    5.3 实验方法
        5.3.1 金纳米生物探针的制备
        5.3.2 直接竞争GNPs-iPCR方法的建立
        5.3.3 GNPs-iPCR方法标准曲线的建立
        5.3.4 GNPs-iPCR方法的重复性
        5.3.5 环境样品的预处理及检测
        5.3.6 方法的回收率检测
    5.4 结果与结论
        5.4.1 生物探针的鉴定
        5.4.2 生物探针的蛋白标记率
        5.4.3 GNPs-iPCR方法的标准曲线
        5.4.4 GNPs-iPCR方法的重复性
        5.4.5 环境样品的检测
        5.4.6 方法的回收率
        5.4.7 几种免疫分析方法的比较
    5.5 本章小结
第六章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 创新性
    6.3 展望
参考文献
缩略词
致谢
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本文编号:3739082

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