以秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）RT130品系为模式生物的环境雌激素活体筛选方法的建立与应

发布时间：2023-04-10 05:55

　　环境雌激素是指能够干扰生物体内激素代谢平衡，从而影响生物体生长、发育、繁殖等生理功能的外源性化学物质。1996年以来，环境中的雌激素类物质造成动物生殖畸变、生殖异常以及人精子数减少等现象，已经引起了世界各国的广泛重视。秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)是一种国际公认的模式生物，易于培养，抵抗环境压力的能力极强，已广泛地应用于环境毒理学研究。RT130品系线虫是由卵黄原蛋白基因vit-2调控报告基因绿色荧光蛋白gfp的基因重组秀丽隐杆线虫。该品系线虫受到紫外光或蓝光激发后肠道处能够发射强烈绿色荧光，可直接通过荧光显微镜观察，荧光信号的强弱可以表征外界雌激素的水平。本文利用RT130品系线虫建立了雌二醇(E2)浓度与荧光强度之间的剂量-效应标准曲线回归方程，初步构建了环境雌激素的活体筛选方法。该筛选方法可应用于实验室内单一目标污染物雌激素当量的测定以及环境中不同水体的综合雌激素效应的实时监测。 (1)在不同浓度的E2溶液中暴露后，报告基因gfp在转基因线虫的肠道处表达，从而发出荧光信号，且gfp表达、荧光信号的强弱与雌激素含量呈正相关，荧光信号的强弱具有雌激素依赖...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
0 前言
1 秀丽隐杆线虫在环境内分泌干扰化合物研究中的应用
    1.1 C. elegans 的内分泌调控机制
        1.1.1 激素的核受体(Nuclear Receptors, NRs)
        1.1.2 蜕皮(Molting)的调控
        1.1.3 寿命(Longevity)的调控
    1.2 利用 C. elegans 对 EDCs 进行筛选
        1.2.1 分子水平
        1.2.2 细胞、组织和器官水平
        1.2.3 个体水平
        1.2.4 种群水平
    1.3 C. elegans 在 EDCs 作用机制研究中的应用
        1.3.1 利用 C. elegans 研究 EDCs 对发育的影响
        1.3.2 利用 C. elegans 研究 EDCs 对寿命的影响
    1.4 研究展望
        1.4.1 利用 C. elegans 研究 EDCs 对细胞增殖与细胞分化的影响
        1.4.2 利用 C. elegans 研究 EDCs 对衰老的影响
    1.5 研究目的与技术路线
        1.5.1 转基因秀丽隐杆线虫 RT130 品系
        1.5.2 研究目的与技术路线
2 利用转基因秀丽隐杆线虫 RT130 品系建立环境雌激素活体筛选方法
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验药品
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验材料
        2.1.4 实验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 E2对转基因秀丽隐杆线虫 RT130 品系绿色荧光强度的影响
        2.2.2 E2标准曲线回归方程的建立
    2.3 讨论
    2.4 小结
3 转基因秀丽隐杆线虫 RT130 品系在单一目标污染物环境雌激素效应活体筛选中的应用
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验药品
        3.1.2 实验材料
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 实验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 不同污染物对转基因秀丽隐杆线虫 RT130 品系绿色荧光强度的影响
        3.2.2 不同污染物的雌激素当量
    3.3 讨论
    3.4 小结
4 利用转基因秀丽隐杆线虫 RT130 品系监测环境中多种污染物的环境雌激素综合效应
    4.1 材料与方法
        4.1.1 水样采集地的选择
        4.1.2 样品预处理
        4.1.3 实验药品
        4.1.4 实验仪器
        4.1.5 实验材料
        4.1.6 实验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 海泊河污水处理厂
        4.2.2 麦岛污水处理厂
        4.2.3 小涧西垃圾填埋场
        4.2.4 青岛近岸不同功能区海域
    4.3 讨论
    4.4 小结
5 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 创新点
    5.3 展望
参考文献
缩略词表
致谢
个人简历
发表的学术论文



本文编号：3788450