角蛋白降解菌的发酵条件优化及相关基因的研究

发布时间：2024-05-28 05:17

　　作为动物羽毛、蹄角、皮毛主要成分的角蛋白,在自然界中普遍存在。由于它具有十分稳定的结构,很难被一般的蛋白酶降解,并且其粗蛋白含量很高,如果直接丢弃会造成蛋白质资源的巨大浪费。微生物分泌的角蛋白酶可以高效地降解角蛋白,这对缓解我国蛋白质资源短缺的现状具有重要意义,同时也有利于环境保护。 本文以角蛋白降解菌GZD-23为研究对象,对其发酵条件进行了优化,并且对其所产的角蛋白酶基因进行了克隆、表达和重组酶的理化特性研究。 采用响应面法优化了角蛋白降解菌GZD-23的发酵条件。通过Plackett-Burman实验筛选出对GZD-23产角蛋白酶有显著影响的三个因素：蔗糖、蛋白胨和pH值。再利用最陡爬坡实验和Box-Behnken实验进行进一步优化,最终确定角蛋白降解菌GZD-23产角蛋白酶的最佳发酵条件为：蔗糖1.6%,蛋白胨0.79%,pH9.17,羽毛含量20g/L,摇床转速100rpm/min,发酵温度30℃,接种量7%,装液量150mL。按上述条件进行发酵,测得角蛋白酶的酶活为4.91U/mL,较发酵条件未优化的菌株提高了104.58%,与预测值4.96U/mL基本相符。 对角蛋白降解...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-2角蛋白多肽链的二级结构

角蛋白降解窗的发酵条件优"ft及相关基因的研究的具体情况见图1-2。0??.?Z %負：爲。^^调III i?—/iS^i"、0贫御供,c^ II 1^^‘hv<kog?nbond hyi^ro^enbond<X-螺旋结构 p—折叠结构图1-2角蛋白多....

图3-1GZD-23基因组DNA电泳图

图3-1GZD-23基因组DNA电泳图Fig.3-1ElectrophoretogramofgenomicDNAofGZD-23M：1KbPlusDNAMarker；1：GZD-23基因组DNA条带角蛋白酶基因全长的克隆以GZD-23基因组DNA为....

图3-2角蛋白酶基因PCR图

以GZD-23基因组DNA为模板，GZD-F/GZD-R为引物扩增角蛋白酶基因，得到目的基因的大小为1100bp左右，与预计的1146bp相符。结果见图3-2。44

图3一3质粒DN人电泳图

unuii图3-3质粒DNA电泳图 m3-4双酶切电泳图-Fig,3-3Electrophoretogramofplasmid Fig.3-4ElectrophoretogramofdoubleDNA digestD：空载体对照；1?3:质粒DNA条带 M:I....

本文编号：3983540