纳米ZnO对斑马鱼胚胎的发育毒性研究
发布时间：2023-09-17 14:39
随着纳米技术的迅速发展，纳米材料在工业生产和日常生活中广泛、大量的应用，其不可避免的进入环境领域，从而造成纳米材料对生态环境和人类健康的危害。本论文以斑马鱼胚胎为受试生物，结合纳米材料毒性研究现状，选择典型的纳米材料纳米ZnO为研究对象，首次系统全面的评估了纳米ZnO对胚胎急性毒性，氧化应激与细胞凋亡，为完善纳米ZnO的毒理学数据与系统地环境风险评价提供科学依据。 对纳米材料进行表征的结果表明纳米ZnO在水溶液中分散性良好，呈板条状晶型，1、20、50、100mg/L纳米ZnO粒径基本分布在100nm以下，符合后续试验要求。对斑马鱼胚胎进行纳米ZnO急性毒性暴露，得出纳米ZnO96hLC50为60mg/L。斑马鱼胚胎的存活率、心率、孵化率等随着纳米ZnO浓度的升高而降低，虽然96h纳米ZnO暴露使斑马鱼体重、体长有一定程度的降低，但变化不显著。同时，纳米ZnO诱导胚胎畸形，主要表现为心包水肿、卵黄囊水肿和尾部畸形。此外，虽然纳米ZnO溶液有Zn2+溶出，但对其毒性影响不大。 3-15天纳米ZnO处理后，抗氧化酶变化呈现一定的时间-效应及浓度-效应变化关系。MDA含量被诱导，随暴露浓度增...
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 课题背景
1.2 纳米材料概述
1.2.1 纳米材料简介
1.2.2 纳米材料的应用领域
1.2.3 纳米 ZnO
1.3 纳米材料的暴露及危害
1.3.1 纳米材料的来源
1.3.2 纳米材料的暴露途径
1.3.3 纳米材料的危害
1.3.4 纳米材料致毒机致
1.4 纳米材料毒性的国内外研究现状
1.4.1 细胞毒性
1.4.2 基因毒性
1.4.3 神经毒性
1.4.4 生长发育毒性
1.4.5 纳米 ZnO 对生物的毒性效应
1.5 斑马鱼模式生物
1.5.1 斑马鱼简介
1.5.2 斑马鱼特点及优势
1.5.3 斑马鱼及其胚胎在毒理学研究中的应用
1.6 本论文研究目的及意义
1.7 本文的主要研究内容及技术路线
第2章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验用鱼
2.1.2 纳米 ZnO 的形态
2.1.3 实验试剂
2.1.4 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 纳米 ZnO 的表征
2.2.2 斑马鱼受精卵的收集与培养
2.2.3 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎的急性毒性实验
2.2.4 酶活性测定
2.2.5 AO 染色测定细胞凋亡
2.2.6 活性氧测定
2.2.7 细胞周期测定
2.2.8 细胞凋亡基因及抗氧化酶基因测定
2.3 结果统计分析及数据处理
第3章 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎的急性毒性
3.1 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎的急性毒性
3.1.1 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎死亡率的影响
3.1.2 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎心率的影响
3.1.3 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎体长的影响
3.1.4 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎体重的影响
3.1.5 纳米 ZnO 和 Zn2+暴露对斑马鱼胚胎畸形的影响
3.1.6 纳米 ZnO 暴露对斑马鱼胚胎孵化率的影响
3.2 本章小结
第4章 纳米 ZnO 对酶活性的影响
4.1 纳米 ZnO 长期暴露对斑马鱼酶活性的影响
4.1.1 SOD 活性的影响
4.1.2 CAT 活性的影响
4.1.3 GPX 活性的影响
4.1.4 MDA 活性的影响
4.2 纳米 ZnO 暴露对抗氧化酶基因的影响
4.3 本章小结
第5章 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎细胞凋亡的影响
5.1 细胞凋亡检测
5.1.1 AO 染色观察细胞凋亡
5.1.2 流式细胞仪测定细胞周期
5.1.3 纳米 ZnO 对活性氧(ROS)的影响
5.2 纳米 ZnO 对细胞凋亡酶活性的影响
5.3 纳米 ZnO 暴露对细胞凋亡基因表达的影响
5.3.1 RNA 测定结果
5.3.2 纳米 ZnO 对 P53、Bax、cas-3、cas-9 等基因表达的影响
5.4 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果
致谢
本文编号：3847628
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 课题背景
1.2 纳米材料概述
1.2.1 纳米材料简介
1.2.2 纳米材料的应用领域
1.2.3 纳米 ZnO
1.3 纳米材料的暴露及危害
1.3.1 纳米材料的来源
1.3.2 纳米材料的暴露途径
1.3.3 纳米材料的危害
1.3.4 纳米材料致毒机致
1.4 纳米材料毒性的国内外研究现状
1.4.1 细胞毒性
1.4.2 基因毒性
1.4.3 神经毒性
1.4.4 生长发育毒性
1.4.5 纳米 ZnO 对生物的毒性效应
1.5 斑马鱼模式生物
1.5.1 斑马鱼简介
1.5.2 斑马鱼特点及优势
1.5.3 斑马鱼及其胚胎在毒理学研究中的应用
1.6 本论文研究目的及意义
1.7 本文的主要研究内容及技术路线
第2章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验用鱼
2.1.2 纳米 ZnO 的形态
2.1.3 实验试剂
2.1.4 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 纳米 ZnO 的表征
2.2.2 斑马鱼受精卵的收集与培养
2.2.3 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎的急性毒性实验
2.2.4 酶活性测定
2.2.5 AO 染色测定细胞凋亡
2.2.6 活性氧测定
2.2.7 细胞周期测定
2.2.8 细胞凋亡基因及抗氧化酶基因测定
2.3 结果统计分析及数据处理
第3章 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎的急性毒性
3.1 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎的急性毒性
3.1.1 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎死亡率的影响
3.1.2 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎心率的影响
3.1.3 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎体长的影响
3.1.4 纳米 ZnO 和 Zn2+对斑马鱼胚胎体重的影响
3.1.5 纳米 ZnO 和 Zn2+暴露对斑马鱼胚胎畸形的影响
3.1.6 纳米 ZnO 暴露对斑马鱼胚胎孵化率的影响
3.2 本章小结
第4章 纳米 ZnO 对酶活性的影响
4.1 纳米 ZnO 长期暴露对斑马鱼酶活性的影响
4.1.1 SOD 活性的影响
4.1.2 CAT 活性的影响
4.1.3 GPX 活性的影响
4.1.4 MDA 活性的影响
4.2 纳米 ZnO 暴露对抗氧化酶基因的影响
4.3 本章小结
第5章 纳米 ZnO 对斑马鱼胚胎细胞凋亡的影响
5.1 细胞凋亡检测
5.1.1 AO 染色观察细胞凋亡
5.1.2 流式细胞仪测定细胞周期
5.1.3 纳米 ZnO 对活性氧(ROS)的影响
5.2 纳米 ZnO 对细胞凋亡酶活性的影响
5.3 纳米 ZnO 暴露对细胞凋亡基因表达的影响
5.3.1 RNA 测定结果
5.3.2 纳米 ZnO 对 P53、Bax、cas-3、cas-9 等基因表达的影响
5.4 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果
致谢
本文编号：3847628
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