深圳市大沙河中氨氧化古细菌的种群分布研究
发布时间：2023-12-13 19:22
随着城市化进程的高速发展，城市河流污染问题也日趋严重，氨氮作为城市河流中的主要污染物之一，其能否被有效去除是影响水质情况的一项重要指标。生物脱氮的关键步骤为氨氧化步骤，长期研究表明，参与这一过程的主要微生物为氨氧化细菌（AOB），但是近些年来的研究发现另外一种微生物也具有氨氧化功能，被称作氨氧化古菌（AOA）。目前对它的研究主要集中于海洋、土壤，以及污水处理厂中，城市污染河流的研究则非常缺乏。为了进一步认识AOA在城市轻度污染河流中的种群分布规律，揭示水质因子对它的调控作用以期将其应用于河流水质净化，本课题对一个典型城市轻度污染河流——深圳市大沙河中AOA的种群分布进行了研究。 本课题运用荧光定量PCR技术和FISH技术对深圳市大沙河中AOA及AOB的数量进行了定量研究。在所选取的5个典型水体环境中，AOA的数量均高于AOB的数量，并且在大沙河公园处二者比值达到最大值，对这一断面进行研究也得出了AOA高于AOB的结论。对各典型水体环境的水质指标及菌群数量利用统计软件进行分析得知，大沙河中AOA数量的主要影响因素为氨氮、总氮和总有机碳。 利用克隆文库技术，对大沙河各个典型水体环境中AOA...
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
第1章 绪论
1.1 课题背景
1.1.1 城市河流污染状况
1.1.2 河流水体自净中的氨氧化作用
1.1.3 氨氧化菌群的分类及其研究机制
1.2 氨氧化古细菌的研究进展
1.2.1 功能基因及系统发育研究进展
1.2.2 不同生态系统中氨氧化古细菌的分布
1.2.3 影响氨氧化古细菌种群分布的影响因子
1.3 氨氧化古细菌的研究方法现状
1.3.1 PCR 技术
1.3.2 克隆文库构建技术
1.3.3 荧光定量 PCR 技术
1.3.4 梯度凝胶电泳技术
1.3.5 荧光原位杂交技术
1.4 课题研究目的及内容
1.4.1 课题来源及研究目的
1.4.2 本课题的研究内容
第2章 实验材料与方法
2.1 实验装置
2.1.1 正交实验装置
2.1.2 扩大化实验装置
2.2 实验材料
2.2.1 现场样品采集
2.2.2 影响因子考察用水
2.2.3 主要分子生物学试剂
2.2.4 实验仪器及设备
2.3 实验方法
2.3.1 DNA 提取
2.3.2 目的基因的 PCR 扩增
2.3.3 荧光定量 PCR
2.3.4 克隆文库的构建
2.3.5 荧光原位杂交
2.3.6 水质指标测定方法
2.3.7 数据分析
第3章 大沙河中 AOA 的数量分布规律研究
3.1 大沙河中 AOA 数量检测方法的建立
3.1.1 荧光定量 PCR 引物的选取
3.1.2 标准曲线的绘制
3.2 大沙河中 AOA 的数量分布规律
3.2.1 水体环境的水质理化性质
3.2.2 水体环境 AOA 的菌群数量
3.3 大沙河公园断面 AOA 的数量分布规律
3.3.1 断面水质理化性质
3.3.2 断面 AOA 的菌群数量
3.3.3 FISH 技术验证断面菌群数量
3.4 大沙河中 AOA 的数量分布影响因素
3.5 本章小结
第4章 大沙河中 AOA 的种类分布规律研究
4.1 大沙河 AMOA 基因文库的构建与分析
4.1.1 PCR 引物的选取
4.1.2 PCR 反应条件的优化
4.1.3 克隆基因文库的构建与分析
4.2 大沙河中 AOA 的种类分布规律
4.2.1 AOA 的群落结构
4.2.2 AOA 的系统发育分析
4.2.3 大沙河中 AOA 的种类分布影响因素
4.3 本章小结
第5章 大沙河中 AOA 的影响因素研究
5.1 AOA 数量的影响因素研究
5.1.1 正交表的设计
5.1.2 影响因素分析
5.2 AOA 生长最优条件的确定
5.3 扩大化稳定运行研究
5.3.1 最优条件稳定运行 AOA 数量变化
5.3.2 最优条件稳定运行氨氮浓度变化
5.4 本章小结
结论
参考文献
致谢
本文编号：3873814
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
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摘要
Abstract
目录
第1章 绪论
1.1 课题背景
1.1.1 城市河流污染状况
1.1.2 河流水体自净中的氨氧化作用
1.1.3 氨氧化菌群的分类及其研究机制
1.2 氨氧化古细菌的研究进展
1.2.1 功能基因及系统发育研究进展
1.2.2 不同生态系统中氨氧化古细菌的分布
1.2.3 影响氨氧化古细菌种群分布的影响因子
1.3 氨氧化古细菌的研究方法现状
1.3.1 PCR 技术
1.3.2 克隆文库构建技术
1.3.3 荧光定量 PCR 技术
1.3.4 梯度凝胶电泳技术
1.3.5 荧光原位杂交技术
1.4 课题研究目的及内容
1.4.1 课题来源及研究目的
1.4.2 本课题的研究内容
第2章 实验材料与方法
2.1 实验装置
2.1.1 正交实验装置
2.1.2 扩大化实验装置
2.2 实验材料
2.2.1 现场样品采集
2.2.2 影响因子考察用水
2.2.3 主要分子生物学试剂
2.2.4 实验仪器及设备
2.3 实验方法
2.3.1 DNA 提取
2.3.2 目的基因的 PCR 扩增
2.3.3 荧光定量 PCR
2.3.4 克隆文库的构建
2.3.5 荧光原位杂交
2.3.6 水质指标测定方法
2.3.7 数据分析
第3章 大沙河中 AOA 的数量分布规律研究
3.1 大沙河中 AOA 数量检测方法的建立
3.1.1 荧光定量 PCR 引物的选取
3.1.2 标准曲线的绘制
3.2 大沙河中 AOA 的数量分布规律
3.2.1 水体环境的水质理化性质
3.2.2 水体环境 AOA 的菌群数量
3.3 大沙河公园断面 AOA 的数量分布规律
3.3.1 断面水质理化性质
3.3.2 断面 AOA 的菌群数量
3.3.3 FISH 技术验证断面菌群数量
3.4 大沙河中 AOA 的数量分布影响因素
3.5 本章小结
第4章 大沙河中 AOA 的种类分布规律研究
4.1 大沙河 AMOA 基因文库的构建与分析
4.1.1 PCR 引物的选取
4.1.2 PCR 反应条件的优化
4.1.3 克隆基因文库的构建与分析
4.2 大沙河中 AOA 的种类分布规律
4.2.1 AOA 的群落结构
4.2.2 AOA 的系统发育分析
4.2.3 大沙河中 AOA 的种类分布影响因素
4.3 本章小结
第5章 大沙河中 AOA 的影响因素研究
5.1 AOA 数量的影响因素研究
5.1.1 正交表的设计
5.1.2 影响因素分析
5.2 AOA 生长最优条件的确定
5.3 扩大化稳定运行研究
5.3.1 最优条件稳定运行 AOA 数量变化
5.3.2 最优条件稳定运行氨氮浓度变化
5.4 本章小结
结论
参考文献
致谢
本文编号：3873814
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