毒死蜱对温室土壤中微生物多样性的影响以及厌氧条件下Shewamella oneidensis MR-1生物转化2，4-二

发布时间：2024-03-09 03:03

　　有毒有害物质与微生物间的相互关系一直以来都备受关注,本论文分别从土壤和水环境角度设立了两个子课题。由于目前关于温室种植中,土壤中细菌群落对所喷洒农药的反应的研究报道不多,子课题一直接采用焦磷酸测序法研究了毒死蜱对温室土壤中的细菌多样性的影响,结果发现在喷洒毒死蜱后的第二个采样时间点(第7天),从温室和露天土壤中都检测到,毒死蜱对α-变形杆菌纲(Alphaproteobacteria)、γ-变形杆菌纲(Gammaproteobacteria)以及酸杆菌(Acidobacteria)的亚群1和亚群2都产生了显著影响。在最后一个采样时间点(第28天),露天土壤中毒死蜱对这些细菌种群的影响已经消除,然而,在温室土壤中其影响却进一步加重。同样的,相比温室土壤,露天土壤在第二个采样时间点时显示的OTU丰度(ACE)和丰度评估指数(Chaol)的下降程度较严重；然而,在最后一个采样时间点时显示的丰度下降程度却比温室土壤要轻微,这可能是由于毒死蜱在温室土壤中的持久性较长,导致毒死蜱对温室条件下的土壤中细菌的影响也较为持久。除了研究一种污染物对微生物的影响,我们也研究了一种微生物对污染物的影响。子课题二...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 毒死蜱对温室土壤中的微生物多样性的影响(课题一)
        1.1.1 温室种植法的特点
        1.1.2 毒死蜱的性质与在生产中的应用
        1.1.3 农药对土壤微生物群落的影响
        1.1.4 毒死蜱对土壤微生物群落的影响
        1.1.5 毒死蜱及其它农药对温室土壤微生物群落的影响
        1.1.6 土壤微生物多样性的传统测定方法
        1.1.7 新一代罗氏454高通量GS FLX法及其应用现状
        1.1.8 课题的研究目标与内容
    1.2 厌氧条件下Shewanella oneidensis MR-1生物转化2,4-二硝基甲苯(课题二)
        1.2.1 2,4-DNT的理化性质
        1.2.2 2,4-DNT的污染现状
        1.2.3 生物法转化2,4-DNT的研究现状
        1.2.4 生物法转化2,4-DNT的机理
        1.2.5 Shewanella Oneidensis MR-1还原转化2,4-DNT的研究现状
        1.2.6 课题的研究目标与内容
第二章 毒死蜱对温室土壤中的微生物多样性的影响
    2.1 引言
    2.2 实验试剂与仪器
        2.2.1 主要试剂
        2.2.2 主要仪器
    2.3 实验过程与方法
        2.3.1 场地描述、土壤取样和DNA提取
        2.3.2 土壤中毒死蜱的提取
        2.3.3 毒死蜱的气相检测
        2.3.4 萃取回收率试验
        2.3.5 土壤样品中的毒死蜱残留检测
        2.3.6 土壤pH分析
        2.3.7 土壤有机质含量分析
        2.3.8 焦磷酸测序
        2.3.9 测序数据的群落分析
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 萃取回收率
        2.4.2 温室和露天土壤中的毒死蜱残留
        2.4.3 毒死蜱对不同分类水平上的细菌群落的影响
    2.5 本章小结
第三章 厌氧条件下Shewanella oneidensis MR-1生物转化2,4-二硝基甲苯
    3.1 引言
    3.2 实验试剂与仪器
        3.2.1 主要试剂
        3.2.2 菌株
        3.2.3 主要仪器
    3.3 实验过程与方法
        3.3.1 储备液的制备
        3.3.2 基础培养基(BSM)的制备
        3.3.3 S. oneidensis MR-1的保存与培养
        3.3.4 平板计数法
        3.3.5 2,4-DNT浓度与S. oneidensis MR-1厌氧生长试验
        3.3.6 S. oneidensis MR-1对2,4-DNT的生物转化试验
        3.3.7 pH对S. oneidensis MR-1转化2,4-DNT的影响试验
        3.3.8 温度对S. oneidensis MR-1转化2,4-DNT的影响试验
        3.3.9 黄素对S. oneidensis MR-1转化2,4-DNT的影响试验
        3.3.10 化学分析
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 标准曲线
        3.4.2 S. oneidensis MR-1以2,4-DNT为唯一电子受体生长
        3.4.3 S. oneidensis MR-1生物转化2,4-DNT
        3.4.4 2,4-DNT的还原转化中间产物及途径分析
        3.4.5 黄素对2,4-DNT生物转化的促进作用
        3.4.6 酸碱度对S. oneidensis MR-1转化2,4-DNT的影响
        3.4.7 温度对S. oneidensis MR-1转化2,4-DNT的影响
    3.5 本章小结
第四章 总结和展望
参考文献
附录
    附录1 土壤样品中的毒死蜱残留量数据表
    附录2 丰度值和多样性评估结果补充表
    附录3 16S rRNA基因序列的稀疏曲线补充图
致谢
攻读硕士学位期间发表学术论文情况



本文编号：3922801