瓜类枯萎病生防菌WQ-6的筛选鉴定、发酵工艺优化及防效研究

发布时间：2022-07-02 12:13

　　为研发对瓜类枯萎病有防治作用的微生物菌剂,以4种枯萎病菌（黄瓜2种、西瓜1种、甜瓜1种）为供试病原菌,采用平板对峙法结合抑制菌丝生长速率法,从蚯蚓堆肥中筛选到1株对4种病原菌均有显著抑制效果的拮抗细菌WQ-6。鉴定发现,WQ-6为暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）。通过单因素试验和响应面分析法优化培养条件,获得了菌株WQ-6最适的发酵工艺（葡萄糖30 g·L-1,蛋白胨30 g·L-1,硫酸镁1 g·L-1,甘油1 g·L-1,磷酸氢二钾1.5 g·L-1,温度32.2℃,装液量19.2%,转速236.2 r·min-1,pH 6.0,接种量4%,培养时间24 h）,使得WQ-6发酵液对枯萎病菌的抑菌直径和抑菌率较优化前分别增加了3.52～10.45 mm和2.28%～32.16%。黄瓜、西瓜和甜瓜种子发芽和盆栽试验表明,菌株WQ-6使接种枯萎病菌的种子发病率降低了32%～68%,发芽率提高了100%～259.6%,植株病情指数下降了20%～34%。此外,菌株WQ-6发酵液复配蚯蚓堆肥浸提液后,与WQ-6发酵液相比,种子的根长、茎长和活力指数显著提高,对病原菌的防治效... 

【文章页数】：15 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 供试材料
    1.2 蚯蚓堆肥中拮抗细菌的分离与筛选
        1.2.1 拮抗细菌的分离与初筛
        1.2.2 拮抗细菌的复筛
    1.3 拮抗细菌的鉴定
        1.3.1 形态学和生理生化鉴定
        1.3.2 16S rRNA序列分析及系统发育树的构建
    1.4 拮抗细菌的培养条件优化
        1.4.1 单因素筛选最适培养条件
        1.4.2 响应面分析（RSM）法优化最适培养条件
        1.4.3 优化前后的抑菌率比较
    1.5 拮抗细菌的防效试验
        1.5.1 种子发芽
        1.5.2 盆栽
2 结果与分析
    2.1 蚯蚓堆肥中拮抗细菌的分离筛选
    2.2 菌株WQ-6的鉴定
    2.3 菌株WQ-6培养条件的优化
        2.3.1 单因素试验法筛选最适培养基
        2.3.2 单因素试验法筛选最适发酵条件
        2.3.3 Plackett-Burman试验结果
        2.3.4 Central Composite Design试验结果与模型建立
        2.3.5 响应面试验结果
        2.3.6 回归模型的验证结果
    2.4 优化前后WQ-6发酵液活性比较
    2.5 菌株WQ-6的防效
        2.5.1 种子发芽防效试验
        2.5.2 盆栽防效试验
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]解淀粉芽胞杆菌JNC2摇瓶发酵条件优化[J]. 梁艳琼,吴伟怀,习金根,李锐,郑金龙,黄兴,贺春萍,易克贤.  草业科学. 2019(08)
[2]甜瓜连作障碍研究进展[J]. 彭云,齐英杰,姜桂翠,吴新爱.  安徽农学通报. 2019(12)
[3]拮抗细菌菌株YJ15的分离鉴定、发酵条件优化及对越橘灰霉病的防效[J]. 王春伟,王燕,张曦倩,董田,温智浩,刘倩茹,李田丽,王怡惠,王赛风,张作刚,王建明,王美琴.  园艺学报. 2018(10)
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[5]棉隆熏蒸与微生物有机肥联用对西瓜枯萎病的防控研究[J]. 曹云,宋修超,郭德杰,王秋君,马艳,沈其荣.  土壤. 2018(01)
[6]解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）XZ-1发酵条件的优化[J]. 杨冬静,赵永强,孙厚俊,张成玲,徐振,谢逸萍.  江西农业学报. 2017(10)
[7]蚯蚓粪及浸提液对番茄根结线虫的防治效果[J]. 刘大伟,韩文昊,张艳菊,吴凤芝,刘霆.  中国生物防治学报. 2017(05)
[8]解淀粉芽胞杆菌B1619防控设施番茄枯萎病田间使用技术研究与示范[J]. 王璐瑶,李兴东,段天凤,杨晓云,刘永峰,陈志谊.  中国生物防治学报. 2017(04)
[9]对黄瓜枯萎病具防效的海洋源芽孢杆菌Y3F的鉴定[J]. 陈香,唐彤彤,孙星,刘勤.  微生物学通报. 2017(10)
[10]禾谷镰刀菌拮抗菌株的筛选及鉴定[J]. 王瑶,赵月菊,邢福国,王龑,刘阳.  核农学报. 2017(06)

硕士论文
[1]黄瓜枯萎病拮抗细菌的筛选、发酵及生防机理研究[D]. 祝久香.中南林业科技大学 2019
[2]拮抗细菌的分离鉴定及其对苦瓜枯萎病生防潜力的研究[D]. 崔宁.山东农业大学 2017
[3]蚯蚓粪中黄瓜枯萎病菌拮抗细菌的筛选、发酵条件优化及防治效果[D]. 王莹.东北农业大学 2015
[4]瓜类枯萎病菌四种专化型的生物学特性及瓜类枯萎病生物防治研究[D]. 沈文渊.四川农业大学 2012



本文编号：3654344