转录因子CsWRKY61对柑橘溃疡病抗性的影响

发布时间：2023-05-14 03:32

　　【背景】柑橘溃疡病(citrus bacterial canker,CBC)是世界柑橘产业上危害最严重的病害之一,由柑橘黄单胞杆菌柑橘亚种(Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc)引起,在国内外被列为检疫对象。由于柑橘分子病理研究相对滞后,导致可供利用的抗性基因资源相对匮乏。WRKY转录因子参与植物抵御生物和非生物胁迫反应,前期研究发现柑橘WRKY转录因子可能在调控寄主抗病反应中起着重要作用。【目的】通过对超量表达CsWRKY50、CsWRKY61和CsWRKY72转基因晚锦橙(Citrus sinensis)的溃疡病抗性进行评价,明确这些基因在柑橘响应溃疡病菌侵染中的生物学功能和抗病育种价值。进一步利用RNA-Seq解析CsWRKY61调控的信号通路。【方法】利用农杆菌介导法进行柑橘遗传转化,获得超量表达CsWRKY50、CsWRKY61和CsWRKY72的晚锦橙;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析转基因植株中目的基因的表达水平以及拷贝数;以非转基因植株为对照,采用离体针刺接种评价转基因植株对溃疡病的抗性;通过比较超量表达CsWRKY61和野生...

【文章页数】：16 页

【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 试验材料
    1.2 植物表达载体的构建
    1.3 柑橘遗传转化
    1.4 GUS组织化学染色
    1.5 转基因植株PCR鉴定
    1.6 外源基因拷贝数的实时荧光定量PCR(q RT-PCR）分析
    1.7 目的基因表达水平的实时荧光定量PCR分析
    1.8 转基因植株的溃疡病抗性评价
    1.9 转录组测序分析
    1.1 0 数据分析
2 结果
    2.1 超量表达Cs WRKY50、CsWRKY61和CsWRKY72晚锦橙植株的获得
    2.2 转基因植株外源基因拷贝数及目的基因表达水平
    2.3 转基因植株溃疡病抗性评价
    2.4 超量表达Cs WRKY61对植株表达谱的影响
3 讨论
4 结论



本文编号：3817099