广东省国兰病毒病害调查及CymMV和ORSV基于cp基因的系统进化分析

发布时间：2024-02-22 09:09

　　为调查广东省国兰病毒病发生情况,采用双抗体夹心-酶联免疫吸附测定(double sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)法对采集自广州市、汕头市和韶关市兰花主产区的53份具有典型病毒病症状的国兰叶片进行检测,选取35份病叶应用RT-PCR技术对检测结果进行验证,并基于cp基因序列对检测到的病毒进行系统进化分析。DAS-ELISA检测结果显示,53份病叶中有44份检出病毒,总检出率为83.02%;其中,有14份仅检出建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV),有19份仅检出齿兰环斑病毒(Odontolossum ring spot virus,ORSV),有11份检出CymMV和ORSV复合侵染,检出率分别为26.42%、35.85%和20.75%。RT-PCR检测结果显示,35份病叶中有30份检出病毒,总检出率为85.71%;其中,有21份仅检出CymMV,有6份仅检出ORSV,有4份检出CymMV和ORSV复合侵染,检出率分别为60.00%、17.14%和11.43%,但未检测到其它病毒。...

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【部分图文】：

图1采集的疑似感染病毒病国兰代表性叶片

供试植物：本氏烟草Nicotianabenthamiana由本实验室保存并提供，于16h光照（25℃）/8h黑暗（20℃）、相对湿度50%～80%的培养室中培养。健康的无病毒国兰叶片采集自广东省农业科学院环境园艺研究所兰花种质资源圃组培脱毒苗。试剂：DAS-ELISA试剂盒....

图3基于CP氨基酸序列以邻接法构建CymMV各分离物的系统进化树

系统进化分析显示，35个CymMV分离物可聚类为3个类群Ⅲ、Ⅲ和Ⅲ（图3）。类群Ⅲ又可分为亚群A和B，本研究获得的CymMV分离物ZC29与新加坡、日本、韩国、印度和中国的CymMV分离物聚类于亚群A；另外4个CymMV分离物ZC17、ZC23、GZV013和GZV015的亲缘关....

图2广东省国兰病样中CymMV和ORSV的RT-PCR检测结果

选取35份疑似病样进行CymMV、ORSV、CMV、CaCV和BaRMV的RT-PCR检测，结果显示，除CymMV和ORSV外，未检测到其它病毒。35份样品中扩增出与CymMV目标片段一致的780bp特异性条带的样品有25个，包括ST-6、ZC-30、ZC-29、ZC-28、Z....

图4基于CP氨基酸序列以邻接法构建ORSV各分离物的系统进化树

系统进化分析结果显示，43个ORSV分离物可聚类为2个类群Ⅲ和Ⅲ（图4）。本研究的6个ORSV分离物WY002、GZV009、GZV005、GZV006、WY003和ZC005与来自中国、韩国、印度尼西亚和德国等国家的ORSV分离物被聚类在Ⅲ类群，且Ⅲ类群中ORSV分离物的寄主包....

本文编号：3906570