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巴西橡胶树MADS-box基因家族6个成员的染色体物理定位

发布时间:2021-09-28 01:14
  MADS-box基因家族广泛分布于真核生物中,巴西橡胶树的MADS-box基因家族主要参与花形态建成,对生殖生长起到重要的调节作用。目前,MADS-box基因家族的26个相关基因已被克隆分析,但它们在染色体上的具体位置还未确定。本研究以巴西橡胶树‘热研7-33-97’品种为材料,将MADS-box基因家族的6个成员(HbAGL8、HbAG15、HbAGL30、HbTT16、HbAP1和HbSVP1)定位在细胞核染色体上,通过双探针荧光原位杂交技术(FISH)对巴西橡胶树MADS-box基因家族的这6个成员在细胞核染色体上进行物理定位分析。结果表明:MADS-box基因家族的6个基因分别位于不同的染色体上,其中HbAGL15、HbAG8、HbAG30和HbSVP1基因定位在第4、5、7和8号染色体长臂上,其信号位点到着丝粒的平均百分距离是11.85、39.71、48.94和6.70;HbTT16和HbAP1基因定位在第1和13号染色体短臂上,其信号位点到着丝粒的平均百分距离是22.19和18.01。本研究结果揭示了巴西橡胶树MADS-box基因家族的6个成员在细胞核染色体上的实际位置,展... 

【文章来源】:热带作物学报. 2020,41(12)北大核心CSCD

【文章页数】:7 页

【部分图文】:

巴西橡胶树MADS-box基因家族6个成员的染色体物理定位


橡胶树古铜期嫩叶(A)与黄绿色嫩叶(B)

原位杂交,有丝分裂,荧光,染色体


制作探针时,Hb AGL8目的序列用生物素标记,Hb AGL15目的序列用地高辛标记,然后进行双探针荧光原位杂交实验,以检测其在染色体上的实际位置。杂交检测过程中2个基因的信号位点在细胞分裂间期、前期和中期均能同时检测到,并且红色和绿色荧光位点明显分布在不同的染色体上(图2A、图2B、图2C);阴性对照试验中,不加入探针进行荧光原位杂交,用荧光显微镜检测时检测不到任何荧光信号(图2D)。以高和琼等[26]分析的‘热研7-33-97’品种的核型所得的核型参数为依据,进行中期染色体核型分析,得到核型图(图2E)和核型模式图(图5)。结果表明,Hb AGL8定位在5号染色体长臂上,信号位点到着丝粒的百分距离平均值为39.71;Hb AGL15位于4号染色体长臂上,信号位点到着丝粒的百分距离平均值11.85。2.2 Hb AGL30和Hb TT16基因的FISH检测与物理定位分析

原位杂交,有丝分裂,荧光,染色体


制作探针时,Hb TT16目的序列用生物素标记,Hb AGL30目的序列用地高辛标记,进行双探针荧光原位杂交实验,检测其在染色体上的实际位置。杂交检测过程中2个基因的信号位点在细胞分裂间期、前期和中期均能同时检测到,并且红色和绿色荧光位点明显分布在不同的染色体上(图3A、图3B、图3C);阴性对照试验中,不加入探针进行荧光原位杂交,用荧光显微镜检测时检测不到任何荧光信号(图3D)。以高和琼等[26]分析的‘热研7-33-97’品种的核型所得的核型参数为依据,进行中期染色体核型分析,得到核型图(图3E)和核型模式图(图5)。结果表明:Hb TT16定位在1号染色体短臂上,信号位点到着丝粒的百分距离平均值为22.19;Hb AGL30位于7号染色体长臂上,信号位点到着丝粒的百分距离平均值48.94。2.3 Hb AP1和Hb SVP1基因的FISH检测与物理定位分析


本文编号:3410963

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