防治松褐天牛成虫的白僵菌菌株室内筛选和鉴定

发布时间：2022-12-06 03:41

　　【目的】筛选对松褐天牛成虫具有高致病力的白僵菌菌株,以期用于防治松褐天牛成虫。【方法】收集被病原真菌感染的松褐天牛幼虫,25℃条件下PDA培养基培养分离纯化病原真菌。使用25℃、相对湿度60%、光周期16 L∶8D条件下羽化5～10天的健壮松褐天牛成虫,生物测定病原真菌致死效果。将PDA培养基上培养获得的病原真菌孢子,分别溶于0.05%的吐温80溶液中,配制成终浓度分别为1×10~6～3×10~6或者1×10~6～3×10~7个·mL^-1的孢子悬浮液,0.05%的吐温80溶液作为空白对照。采用涂枝法和喷洒法处理松褐天牛成虫,以累计校正死亡率为指标评价菌株的致病力。折线图由R包"ggplot2"绘制。采用ITS1和ITS4扩增真菌保守序列,经连接转化后测序。采用软件muscle比对序列,MEGA软件中的最大似然法构建系统发育树。【结果】从感染的23头松褐天牛幼虫中共分离出23株白僵菌菌株,通过喷洒法初步筛选出18天累计校正死亡率在30%以上的6个菌株。选取B7和B92个产孢量大(14天,10~8·cm^-2)的菌株,涂枝法进行毒力测试结果表明,B... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 供试昆虫与菌株
    1.2 生物测定
    1.3 数据处理
    1.4 DNA提取、PCR扩增及连接转化
    1.5 系统发育树构建
2 结果与分析
    2.1 菌株的分离纯化和初步毒力测试
    2.2 菌株筛选和涂枝法毒力测试
    2.3 B9菌株喷洒法毒力测试
    2.4 菌株鉴定
3 讨论
4 结论



本文编号：3710987