槟榔Catalase基因的克隆及亚细胞定位

发布时间：2023-03-19 14:16

　　过氧化氢酶(Catalase)广泛存在于生物体内,主要功能是清除植物细胞内光呼吸、线粒体电子传递及脂肪β-氧化等过程中产生的H₂O₂,从而保护细胞免于过氧化氢酶的毒害。为了解槟榔过氧化氢酶基因的相关信息,利用植物总RNA提取试剂盒提取槟榔叶片总RNA,通过同源克隆和RACE技术获得槟榔全长cDNA,并对其进行生物信息学分析及亚细胞定位。结果表明:获得ArCAT1(MN692600)、ArCAT2(MN692601)、ArCAT3(MN692602)3个同源基因,其序列全长均为1476 bp,编码492个氨基酸。遗传进化分析显示,ArCATS与同为棕榈科的油棕(Elaeis guineensis)、海枣(Phoenixdactylifera)等植物的过氧化氢酶氨基酸序列具有较高的相似性,其中与油棕的亲缘关系最近。亚细胞定位结果表明,ArCAT1蛋白定位于过氧化物酶体中,而ArCAT2和ArCAT3既定位于过氧化物酶体又定位于细胞核中。这为进一步研究Catalase基因在槟榔中的生物学功能奠定基础。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 叶片总RNA的提取及c DNA合成
        1.2.2 候选基因的同源克隆
        1.2.3 目的基因全长序列克隆
        1.2.4 生物信息学分析
        1.2.5 农杆菌转化和亚细胞定位分析
2 结果与分析
    2.1 目的基因全长序列的克隆
    2.2 Ar CATS基因的生物信息学分析
    2.3 亚细胞定位
3 讨论



本文编号：3765394