黑老虎ISSR-PCR反应体系的建立与优化

发布时间：2021-11-01 22:20

　　为建立和优化特色药食两用植物黑老虎（Kadsura coccinea）的ISSR-PCR反应体系和扩增程序,通过正交和单因素试验研究Mg²⁺、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数等因素对黑老虎ISSR-PCR反应体系扩增效果的影响。结果表明,在20μL的反应体系中,最佳扩增条件为Mg²⁺浓度2.5mmol/L、dNTPs浓度0.1mmol/L、引物浓度0.6μmol/L、Taq DNA聚合酶用量1.50U、模板DNA用量45ng,退火温度50.4℃,循环40次。这一优化体系的建立可为深入开展黑老虎种质资源遗传多样性研究奠定基础。 

【文章来源】：广西科学. 2020,27(04)

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 仪器及药品
    1.3 方法
        1.3.1 黑老虎植物基因组DNA的提取
        1.3.2 ISSR-PCR反应体系正交试验
        1.3.3 ISSR-PCR反应单因素试验设计
        1.3.4 ISSR-PCR反应程序的优化
        1.3.5 ISSR反应体系的验证
2 结果与分析
    2.1 ISSR反应体系正交试验结果
    2.2 Mg2+浓度对ISSR?PCR扩增效果的影响
    2.3 dNTPs浓度对ISSR?PCR扩增效果的影响
    2.4 引物浓度对ISSR?PCR扩增效果的影响
    2.5 Taq DNA聚合酶用量对ISSR?PCR扩增效果的影响
    2.6 模板DNA用量对ISSR?PCR扩增效果的影响
    2.7 退火温度对ISSR?PCR扩增效果的影响
    2.8 循环次数对ISSR?PCR扩增效果的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]极小种群喙核桃ISSR-PCR反应条件的建立与优化[J]. 史艳财,邹蓉,朱成豪,熊忠臣,蒋运生.  广西科学院学报. 2020(01)
[2]特色水果黑老虎的栽培技术[J]. 张海平,覃秀顺,蒋振华.  果树实用技术与信息. 2019(11)
[3]黑老虎的研究进展[J]. 梁忠厚,范适,宋光桃,李有清.  湖南生态科学学报. 2017(03)
[4]黑老虎果实化学成分和生理活性研究进展[J]. 谢玮,张贤贤,平永良.  农产品加工. 2017(02)
[5]木质藤本植物黑老虎的居群结构与动态[J]. 付玉嫔,司马永康,祁荣频,郝佳波,毛云玲,尹艾萍,陈少瑜,刘冬芬,张荣贵.  东北林业大学学报. 2015(09)
[6]不同地区冷饭团单株雌花占比率调查初报[J]. 龙世林,高渐飞,杨红梅,胡瑾,房小晶,范志伟.  耕作与栽培. 2015(03)
[7]甜菜树ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J]. 吴春妍,杨冠松,张爱丽,申仕康,王跃华.  西南农业学报. 2014(06)
[8]广西药用植物两面针遗传多样性的ISSR分析[J]. 向巧彦,黄夕洋,李虹,蒋水元.  广西科学. 2014(05)
[9]黑老虎的药理活性成份研究进展[J]. 石焱芳,陈海玲.  海峡药学. 2013(07)
[10]冷饭团特性及其栽培技术[J]. 吴智涛.  中国园艺文摘. 2012(06)

博士论文
[1]黑老虎及胡桃枝皮的化学成分研究[D]. 李贺然.中国协和医科大学 2006



本文编号：3470789