澳洲棉细菌人工染色体文库构建

发布时间：2021-11-24 05:12

　　携带大片段基因组DNA的细菌人工染色体（bacterial artificial chromosome, BAC）文库是进行基因组结构与功能等相关研究的重要基因组资源。澳洲棉是二倍体野生棉,具有抗或耐棉蚜、抗黄萎病、抗干旱、增加衣分率、提高纤维成熟度的潜力,种子无腺体或植株有腺体等许多优良性状。本研究是在现有的野生棉二倍体和四倍体棉BAC文库基础上,以二倍体野生棉种澳洲棉为实验材料,提取澳洲棉幼嫩叶的DNA,经过HindⅢ酶切片段化,克隆到pSMART BAC （HindⅢ）载体,构建了澳洲棉的基因组细菌人工染色体（bacterial artificial chromosome, BAC）文库。该文库总共包含16 128个克隆（42个384孔板）,平均插入的片段为120 kb,基因组覆盖率约1.06倍。澳洲棉BAC文库的构建将为棉属野生种质资源的保存与利用积累重要基因组资源。 

【文章来源】：分子植物育种. 2020,18(21)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

酶切片段的选择

最佳酶切量的测定

对选择的目的片段进行电洗脱，回收其中的DNA，用已稀释过浓度的λDNA标准液为对照，检测回收的DNA浓度，据条带亮度对比(图4)，得出回收的DNA浓度应在于3～4 ng/μL之间，后续操作按3 ng/μL计算。图2 最佳酶切量的测定


本文编号：3515302