黑果枸杞的愈伤诱导及细胞悬浮体系的建立

发布时间：2022-01-14 13:54

　　以黑果枸杞无菌苗的叶片为材料,对愈伤组织诱导及增殖培养的最佳激素组合进行筛选,通过研究不同初始接种量、碳源、光暗条件对悬浮培养体系的影响,确定最佳培养条件,并对悬浮细胞的生长特性进行监测,建立黑果枸杞细胞悬浮培养体系。结果表明,叶片诱导愈伤的最佳激素组合是WPM+KT 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.0 g/L,诱导率100%,且愈伤组织质地疏松,生长快;最佳细胞悬浮培养条件是:细胞初始鲜重接种量1.5%,碳源为蔗糖,光照培养或弱光培养;所建立的细胞悬浮系生长是"S"型曲线,培养第25 d,细胞生长量最大,细胞干重达到最大值10.1 g/L,是接种时的12.6倍。 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2020,39(11)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

黑果枸杞叶片诱导

根据愈伤诱导及继代培养的试验结果，选择继代20 d左右、疏松型、一致性较强的的叶片愈伤组织进行细胞悬浮培养。初代悬浮细胞在2～4 d后愈伤组织逐渐分散，4～6 d培养液开始变浓，10～20 d细胞处于快速生长期，培养液更加浓稠(图3A),21～25 d趋于稳定，28～30 d后培养液逐渐变灰褐色(图3B)，细胞衰老。初代培养的细胞状态不稳定，大团块较多。去除较大细胞团块的继代1次的细胞分散更快，继代2次之后状态稳定，获得黑果枸杞悬浮培养细胞系。图3 悬浮细胞培养

悬浮细胞培养

【参考文献】：
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本文编号：3588624