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实验性肝损伤小鼠IL
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本站编辑：admin 日期： 2010-08-17 21:29 点击：次
【中文摘要】:
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【中文摘要】目的通过观察肝匀浆白细胞介素-18(interleukin-18, IL-18)、一氧化氮(nitric oxide, NO)在小鼠实验性肝损伤中的水平变化,探讨二者与肝损伤的关系、作用机制及意义,同时应用18α-甘草酸(18α-glycyrrhizic acid, 18α-GL)观察对IL-18和NO水平的影响,探讨其对肝损伤的保护作用及机制。方法选取健康昆明种ICR小鼠48只,6-8周龄,体重20-23g,雌雄各半,随机分为4组,每组12只。第1组为正常对照组(空白组):腹腔注射生理盐水20ml/kg。第2组为D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)中毒病理模型组(模型组):腹腔注射生理盐水20ml/kg。第3组为异甘草酸镁组(18α-甘草酸,治疗组):腹腔注射异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,α-GL )45mg/kg。第4组为复方甘草酸苷组(18β-甘草酸,18β-glycyrrhizic acid, 18β-GL,阳性对照组):腹腔注射复方甘草酸苷(compound glycyrrhizic,β-GL )24mg/kg。第1-2组小鼠每天腹腔注射生理盐水1次;第3组小鼠每天腹腔注射α-GL 1次;第4组小鼠每天腹腔注射β-GL 1次,连续7天,于末次给药1小时后,第1组不给任何处理,第2、3、4组均腹腔注射10%D-GalN(800mg/kg),禁食不禁水。在小鼠腹腔注射10%D-GalN,20小时后摘眼球取血,离心后立即做肝功检测,取肝脏称肝脏总重量,测肝重系数变化,切除部分肝脏-80℃冰箱保存待测,剩余部肝脏用10%甲醛溶液固定备用。采用赖氏改良法测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST);用ABC-酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)法检测肝组织匀浆IL-18含量;用化学比色硝酸还原酶法检测肝组织匀浆NO含量;常规方法制作肝组织切片,苏木精-伊红(hematine eosin ,HE)染色,光镜观察各组肝组织病理学变化。结果D-GalN造成小鼠肝损伤后,病理模型组与正常对照组比较,血清ALT和AST、肝匀浆IL-18和NO、肝重系数值均明显升高,统计学上存在显著性差异(P<0.05)。肝损伤小鼠肝匀浆IL-18和NO水平经spersman分析(非参数检验相关分析),二者呈显著的正相关(r=0.922,P=0.00)。18α-GL治疗组与病理模型组比较,均明显降低肝损伤小鼠血清ALT和AST、肝匀浆IL-18和NO、肝重系数的值,计学上存在显著差异(P<0.05)。病理模型组肝组织大量炎症细胞浸润,肝窦扩张,并有肝细胞的凋亡及坏死;18α-GL治疗组肝组织炎症情况减轻,炎症细胞浸润减少,肝窦充血好转,肝细胞少量水肿、坏死,肝小叶结构趋于正常。结论①肝损伤小鼠肝匀浆IL-18、NO水平明显增高,二者具有相关性,提示IL-18、NO是参与肝细胞损伤的两种重要的细胞因子,二者在肝损伤中具有协同作用。②18α-GL有保护肝脏的作用,它对肝脏的保护作用强于18β-GL。③18α-GL保护肝脏的作用机制可能通过降低IL-18、NO的水平而实现。
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