一株感染铜绿假单胞菌的双链RNA噬菌体PaP6的分离和鉴定

发布时间：2017-12-04 19:12

  本文关键词：一株感染铜绿假单胞菌的双链RNA噬菌体PaP6的分离和鉴定

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【摘要】：【目的】鉴定一株新分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP6的生物学特性。【方法】利用铜绿假单胞菌临床分离株PA038为宿主,从西南医院污水中分离得到一株裂解性噬菌体PaP6,观察其噬斑特点;氯化铯密度梯度离心纯化噬菌体颗粒后,用透射电子显微镜观察噬菌体形态;提取PaP6基因组,通过DNA酶和RNA酶酶切,做基因组酶切图谱分析;按照感染复数(MOI)分别为10、1、0.1、0.01、0.001和0.000 1加入噬菌体和宿主菌,裂解细菌后,测定噬菌体滴度;以MOI=10的比例加入噬菌体和宿主菌,绘制一步生长曲线;用112株铜绿假单胞菌临床分离株检测PaP6宿主谱。【结果】PaP6的噬斑直径约2 mm-4 mm,圆形透明,边缘清晰;PaP6噬菌体呈多面体立体对称的头部,直径约45 nm;酶切图谱表明PaP6基因组对DNase不敏感,对RNase敏感,未酶切基因组具有3节段双链RNA(dsRNA),长度分别约为9.0、4.5、3.5 kb,共约17 kb;当MOI为0.1时PaP6感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高,达到3.4×109 PFU/m L;用一步生长曲线描绘了其生长特性;PaP6可以感染40.1%的临床分离株,是一株比较广谱的噬菌体。【结论】首次报道了一株铜绿假单胞菌的ds RNA分节段噬菌体,分类学上属于囊病毒科,该噬菌体具有较广的宿主谱,在噬菌体治疗领域具有应用前景。
【作者单位】： 第三军医大学基础部微生物教研室;菲吉乐科生物科技有限公司;
【基金】：国家自然科学基金项目(No.31570173)~~
【分类号】：R378
【正文快照】： 铜绿假单胞菌是一种常见的机会致病菌,常导致囊性纤维化病人的肺部感染以及免疫力低下人群的感染,如烧伤和艾滋病人[1]。随着抗生素的广泛应用甚至滥用,铜绿假单胞菌的耐抗生素现象越来越普遍,多重耐药的铜绿假单胞菌越来越常见于临床,给临床治疗带来巨大挑战。因此,噬菌体治

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 周莹冰;申晓冬;李明;黄建军;胡晓梅;饶贤才;胡福泉;;铜绿假单胞菌噬菌体PaP3生物学特性的研究[J];解放军医学杂志;2006年10期

2 黄建军,胡晓梅,饶贤才,张克斌,金晓琳,周莹冰,李明,申晓冬,朱军民,胡福泉;铜绿假单胞菌噬菌体PaP2生物学特性的研究[J];第三军医大学学报;2004年13期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郭棵棵;杨雨卉;沈伟;费文斌;乐率;胡福泉;;一株感染铜绿假单胞菌的双链RNA噬菌体PaP6的分离和鉴定[J];微生物学通报;2016年05期

2 邬亭亭;刘平;郭述良;罗永艾;;噬菌体33D生物学特性及其潜在抗耐药结核的实验研究[J];西部医学;2015年11期

3 姚义勇;江莉莎;张莉;郭述良;柳岩;;分枝杆菌噬菌体Guo1环状基因组特征及生物学特性分析[J];微生物学通报;2015年08期

4 南南;曹放;沈俊涛;绳傲楠;孙亚琴;牟英;修志龙;;一株产1,3-丙二醇的克雷伯氏菌的噬菌体生物学特性[J];微生物学报;2013年09期

5 张琳;乐率;卢曙光;姚新月;赵岩;王竞;谭银玲;胡福泉;李明;;铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的分离与鉴定[J];微生物学通报;2013年04期

6 崔尹赡;易萍;许忠福;魏云林;张琦;林连兵;季秀玲;;一株假单胞菌属低温噬菌体的分离及其特性研究[J];中国微生态学杂志;2013年03期

7 刘平;邬亭亭;彭丽;郭述良;罗永艾;;噬菌体Legendre的生物学特性及抗耐药结核潜力的初步研究[J];第三军医大学学报;2012年09期

8 邬亭亭;刘平;罗永艾;郭述良;;分枝杆菌噬菌体D29的生物学特性研究及其抗耐药结核潜力的探讨[J];世界科技研究与发展;2012年02期

9 曾林;邱德全;谢警鸿;于鸽;;一株溶藻弧菌噬菌体的生理特性研究[J];广东海洋大学学报;2012年01期

10 刘斌;JOST Günter;SCHMIEL Juliane;WOLF Arite;黄翔玲;谷力;王玉桥;叶德赞;;源于克雷伯氏菌Klebsiella sp. AC-11的3株噬菌体的生物学特性[J];海洋学报(中文版);2011年04期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 李明,申晓冬,周莹冰,黄建军,胡晓梅,饶贤才,胡福泉;铜绿假单胞菌噬菌体PaP1生物学特性的研究[J];第三军医大学学报;2005年09期

2 黄建军,胡晓梅,饶贤才,张克斌,金晓琳,周莹冰,李明,申晓冬,朱军民,胡福泉;铜绿假单胞菌噬菌体PaP2生物学特性的研究[J];第三军医大学学报;2004年13期

3 黄建军,胡晓梅,朱军民,申晓冬,李明,饶贤才,胡福泉;铜绿假单胞菌噬菌体PaP2的结构蛋白及其编码基因的研究[J];医学研究生学报;2004年04期

4 张克斌,陈志瑾,金晓琳,饶贤才,胡福泉;铜绿假单胞菌噬菌体的分离鉴定及耐噬菌体突变频率测定[J];微生物学通报;2002年01期

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本文编号：1252047