秀丽隐杆线虫-耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染模型的建立及应用
发布时间：2021-03-07 17:34
研究背景:肺炎克雷伯菌（Klebsiella Pneumoniae,KP）是一种较短粗的革兰阴性杆菌,无芽胞,无鞭毛,有较厚的荚膜,多数有菌毛。肺炎克雷伯菌是人类正常微生物菌群主要的组成细菌之一,同时也是一种机会致病菌,当机体免疫力低下时可逃避宿主免疫反应而致病。肺炎克雷伯菌能够扰乱正常的微生物菌群并在胃肠中进行初始定植同时抑制宿主免疫。自20世纪70年代以来,由于抗生素滥用导致多种细菌出现广泛耐药性,近年来多重耐药致病菌的数量急剧增加。多重耐药的肺炎克雷伯菌感染是全球医院感染的主要病因之一,在住院患者中易引起尿路感染、肺炎和腹腔内感染,尤其在医院重症监护病房革兰氏阴性菌感染中,约15%是由多重耐药肺炎克雷伯菌引起。1996年Mackenzie等首次报道耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP）,随后CRKP陆续在美国、英国、雅典、中国等地被发现。碳青霉烯酶是肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物耐药的主要原因,它能够有效的水解青霉素、头孢菌素、氨曲南、碳青霉烯类等多种抗生素。碳青霉烯酶的相关耐药基因主要位于质粒和转...
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
秀丽隐杆线虫生活史在实验室中，线虫通常在含有大肠杆菌菌苔的琼脂平板上生长，当细菌消耗殆尽，可利用自身的脂肪供应
图 2 不同培养条件对 CRKP 感染后线虫存活率的影响虫-CRKP 感染模型中感染浓度的选择显微镜下观察未感染的线虫呈正弦运动，并伴有口咽部的活动（图 3A）；的线虫，其肠道明显膨胀，身体呈僵直不动的状态，无口咽部的活动（图 3观察到感染和未感染的线虫行为学出现明显改变，感染后的线虫不能马上达态，往往处于一种缓慢致死的虚弱状态。用不同浓度的 CRKP 感染线虫 36 小时后，观察线虫的活动情况。在不同的（108cfu/mL、 107cfu/mL、 106cfu/mL、 105cfu/mL、空白对照组）下，最活动的线虫分别为 7.84% 、3.448%、6.667%、3.7%、100%（图 3C）。各阴性对照组相比均具有明显的统计学差异（χ2=56.44 P<0.0001），不同起始对于线虫均能达到初步感染的目的，使线虫自主活动丧失。其中 108cfu/m半数线虫出现自主运动消失的初步感染时间大约为 9h、 107cfu/mL 感染组106cfu/mL、105cfu/mL 组分别为 15h、18h。为尽可能缩短试验用时同时控制生长繁殖，选择 106cfu/mL 终浓度为试验起始菌液浓度。
A：感染前线虫的形态（10X）； B：感染后线虫的形态（10X）；C：不同菌量的 CRKP 感染线虫后线虫的生存曲线图 3 不同浓度 CRKP 感染的秀丽隐杆线虫生存曲线KP 感染线虫后细菌在体内的分布一步证实线虫肠道的膨胀是由于 CRKP 的定植，实验采用细胞荧光标P、OP50，来找到细菌作用于线虫的可能感染路径。两组均与线虫共培光显微镜观察菌体在线虫中的分布。结果表明，对照组线虫未出现细长。（图 4A），而感染后的线虫肠道内充满了进食后标记了红色致肠腔膨胀（图 4B、C）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]秀丽隐杆线虫-泛耐药肺炎克雷伯菌感染模型的建立[J]. 王讯,孙树梅,欧阳妮,张亚莉,芮勇宇. 中国感染控制杂志. 2016(07)
[2]秀丽隐杆线虫-白念珠菌感染模型用于抗真菌药效评价的研究[J]. 毕爽,胡淦海,胡丹丹,姜远英,王彦. 中国真菌学杂志. 2016(03)
[3]利用秀丽隐杆线虫构建抗菌物质体内筛选模型[J]. 陈丽红,孙利芹,王长海. 烟台大学学报(自然科学与工程版). 2012(02)
[4]秀丽隐杆线虫-耐药铜绿假单胞菌感染模型的建立[J]. 周雨朦,陈代杰,李继安,邵雷,朱春宝. 中国抗生素杂志. 2011(07)
本文编号：3069524
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
秀丽隐杆线虫生活史在实验室中，线虫通常在含有大肠杆菌菌苔的琼脂平板上生长，当细菌消耗殆尽，可利用自身的脂肪供应
图 2 不同培养条件对 CRKP 感染后线虫存活率的影响虫-CRKP 感染模型中感染浓度的选择显微镜下观察未感染的线虫呈正弦运动，并伴有口咽部的活动（图 3A）；的线虫，其肠道明显膨胀，身体呈僵直不动的状态，无口咽部的活动（图 3观察到感染和未感染的线虫行为学出现明显改变，感染后的线虫不能马上达态，往往处于一种缓慢致死的虚弱状态。用不同浓度的 CRKP 感染线虫 36 小时后，观察线虫的活动情况。在不同的（108cfu/mL、 107cfu/mL、 106cfu/mL、 105cfu/mL、空白对照组）下，最活动的线虫分别为 7.84% 、3.448%、6.667%、3.7%、100%（图 3C）。各阴性对照组相比均具有明显的统计学差异（χ2=56.44 P<0.0001），不同起始对于线虫均能达到初步感染的目的，使线虫自主活动丧失。其中 108cfu/m半数线虫出现自主运动消失的初步感染时间大约为 9h、 107cfu/mL 感染组106cfu/mL、105cfu/mL 组分别为 15h、18h。为尽可能缩短试验用时同时控制生长繁殖，选择 106cfu/mL 终浓度为试验起始菌液浓度。
A：感染前线虫的形态（10X）； B：感染后线虫的形态（10X）；C：不同菌量的 CRKP 感染线虫后线虫的生存曲线图 3 不同浓度 CRKP 感染的秀丽隐杆线虫生存曲线KP 感染线虫后细菌在体内的分布一步证实线虫肠道的膨胀是由于 CRKP 的定植，实验采用细胞荧光标P、OP50，来找到细菌作用于线虫的可能感染路径。两组均与线虫共培光显微镜观察菌体在线虫中的分布。结果表明，对照组线虫未出现细长。（图 4A），而感染后的线虫肠道内充满了进食后标记了红色致肠腔膨胀（图 4B、C）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]秀丽隐杆线虫-泛耐药肺炎克雷伯菌感染模型的建立[J]. 王讯,孙树梅,欧阳妮,张亚莉,芮勇宇. 中国感染控制杂志. 2016(07)
[2]秀丽隐杆线虫-白念珠菌感染模型用于抗真菌药效评价的研究[J]. 毕爽,胡淦海,胡丹丹,姜远英,王彦. 中国真菌学杂志. 2016(03)
[3]利用秀丽隐杆线虫构建抗菌物质体内筛选模型[J]. 陈丽红,孙利芹,王长海. 烟台大学学报(自然科学与工程版). 2012(02)
[4]秀丽隐杆线虫-耐药铜绿假单胞菌感染模型的建立[J]. 周雨朦,陈代杰,李继安,邵雷,朱春宝. 中国抗生素杂志. 2011(07)
本文编号：3069524
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