成纤维细胞生长因子受体在成骨细胞中的表达及作用研究
发布时间:2021-03-09 04:50
目的检测成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)1-3在成骨分化不同阶段的表达变化,并明确FGFR信号在成骨分化中的重要作用。方法利用原代成骨细胞和成骨细胞系MC3T3-E1进行成骨诱导,通过形态观察、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色鉴定细胞分化情况,qRT-PCR和Western blot检测成骨分化相关基因和FGFR1-3的表达,并通过阻断FGFR信号观察成骨细胞分化的变化。结果原代成骨细胞ALP染色和茜素红染色阳性,成骨分化相关基因COL 1α、RUNX2、OPN表达增加,在成骨细胞系MC3T3-E1实验中得到了类似结果,而且FGFR1、FGFR2和FGFR3在成骨分化过程中表达增加,阻断FGFR信号可以显著抑制成骨分化,提示FGFR信号参与了成骨细胞分化调控。结论 FGFR信号促进成骨细胞成骨分化。
【文章来源】:第三军医大学学报. 2019,41(24)北大核心
【文章页数】:7 页
【部分图文】:
倒置显微镜下细胞贴壁后形态 (×40)
使用FGFR信号阻断剂后,原代成骨细胞通过ALP染色均发现蓝紫色变浅,茜素红染色发现红色矿化结节形成减少。提取平行培养细胞RNA,qRT-PCR结果显示,与对照组相比,加入FGFR信号阻断剂以后,成骨细胞成骨分化相关基因表达明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。平行培养的MC3T3-E1细胞系进行相同处理后,表现为一致的趋势(图5)。这说明阻断FGFRs信号可抑制成骨细胞成骨分化能力。图3 qRT-PCR检测原代成骨细胞和MC3T3-E1成骨诱导处理后对成骨分化基因的表达情况
qRT-PCR检测原代成骨细胞和MC3T3-E1成骨诱导处理后对成骨分化基因的表达情况
本文编号:3072278
【文章来源】:第三军医大学学报. 2019,41(24)北大核心
【文章页数】:7 页
【部分图文】:
倒置显微镜下细胞贴壁后形态 (×40)
使用FGFR信号阻断剂后,原代成骨细胞通过ALP染色均发现蓝紫色变浅,茜素红染色发现红色矿化结节形成减少。提取平行培养细胞RNA,qRT-PCR结果显示,与对照组相比,加入FGFR信号阻断剂以后,成骨细胞成骨分化相关基因表达明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。平行培养的MC3T3-E1细胞系进行相同处理后,表现为一致的趋势(图5)。这说明阻断FGFRs信号可抑制成骨细胞成骨分化能力。图3 qRT-PCR检测原代成骨细胞和MC3T3-E1成骨诱导处理后对成骨分化基因的表达情况
qRT-PCR检测原代成骨细胞和MC3T3-E1成骨诱导处理后对成骨分化基因的表达情况
本文编号:3072278
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