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干细胞因子修饰的脐带间充质干细胞对造血干细胞的作用

发布时间:2021-03-11 00:35
  干细胞因子(stem cell factor. SCF)是一种多功能细胞因子,参与机体发育中多种细胞的增殖调控,是多种哺乳动物干细胞增殖分化的关键因子。它作用于早期造血干/祖细胞,在维持其存活、促进增殖、及调控其向各系造血分化中起重要作用。人SCF由外显子6蛋白酶解位点选择性剪接形成可溶型(sSCF)与膜结合型(mSCF)两种形式,二者在造血中的作用有所不同。sSCF参与干/祖细胞的动员,而nSCF则被认为是造血微环境’niche"的重要组成分子,参与造血干细胞与"niche"之间的相互作用,造血微环境缺乏nSCF导致造血干细胞重建造血障碍。我们以往的研究结果阐明了sSCF、mSCF可分别通过旁分泌方式和并置性作用机制促进表达c-kit细胞的增殖。不仅如此,在细胞紧密接触的条件下,mSCF的作用更为显著,提示nSCF可能在维持造血干细胞功能以及促进其体内、外扩增方面有独特的效果。本论文在此基础之上,用DNA重组技术成功构建了人可溶型及膜结合型干细胞因子的重组逆转录病毒表达载体MSCV-PGK-GFP-sSCF、MSCV-PGK-GFP-mSCF,二者与空载体MSCV-PGK-GFP分别... 

【文章来源】:北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

干细胞因子修饰的脐带间充质干细胞对造血干细胞的作用


CM一MSCs茜素红染色

生长形态


图1CM一MSCs生长形态Cs成骨诱导分化鉴定5d左右,细胞形态逐渐由长梭形变为方形、鳞片镜下可见细胞质内含颗粒样物质。第8天时,细胞质外均可见较多细小黑色颗粒,胞核颜色较淡,密集,中央可见类似结节状的结构,部分细胞呈现由棕黑色细胞外基质沉积。茜素红染色后镜下可见,呈团样并向四周放射,中心颜色明显加深(图感染后具有向成骨细胞分化的潜能

转染,油红,包装细胞,质体


图3CM一MSCs油红0染色装一GFP一sSCF、MSCV一PGK一GFP一mSCF、MSCV一PGK染法转染Phoenix包装细胞后,荧光显微镜下观察nix细胞都表达GFP标记蛋白(图4)。


本文编号:3075551

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