基于CRISPR/Cas9技术研究弓形虫毒力因子ROP5的转录调控机制

发布时间：2021-03-28 11:25

　　刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）属顶复亚门专性细胞内寄生原虫,是一种世界范围内分布的机会性致病原虫。全世界刚地弓形虫人群感染率约有25%～30%。弓形虫感染在免疫正常的人群中为隐形感染,但是在免疫抑制或缺陷患者（如器官移植患者、艾滋病患者）中,弓形虫感染可引起较为广泛的临床症状严重者可引起死亡。弓形虫感染同时与优生优育有着密切的关系,孕妇在怀孕期间首次感染弓形虫可以引起严重的后果,虫体可穿过胎盘感染胎儿,影响胎儿发育,可导致畸胎、死胎,存活的新生儿也会因为先天性感染常有畸形及智力发育不全等严重后遗症。此外,弓形虫在动物与动物、动物与人之间广泛传播引起人畜共患弓形虫病,严重影响了我国畜牧业的生产和发展,也成为人类感染弓形虫病的重要传染源。弓形虫病已经成为严重的世界性公共卫生问题。弓形虫病引起的临床症状多样性,给临床诊断治疗及预防带来诸多不便。目前弓形虫病的治疗尚无十分有效的治疗药物,仍以传统药物磺胺嘧啶和乙胺嘧啶联合用药为主,由于它们在治疗过程中不能有效杀灭包囊期虫体以及长期使用产生毒副作用,使其应用受到限制。因此寻找有效的预防与治疗措施,开发安全有效的疫苗成为一大趋势。... 

【文章来源】：浙江省医学科学院浙江省

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１弓形虫ＲＨ、ＰＲＵ株基因上游２０００?ｂｐ序列ＰＣＲ结果??Ｃｔｒｌ：?Ｃｏｎｔｒｏｌ；?ＲＨ：?ＲＨ?ｓｔａｉｎ；?ＰＲＵ：?ＰＲＵ?ｓｔａｉｎ??

?????ＧＴＣＧｅｒｒＣＡＴＡＴＴＣＡＣＴＡＡ３ＴＣＡＡＣＣＧＴＣＧＣＡＣＡＣＣＣＧＴＡＣＴＴＣＣＴＣＡＡＴＴＴＣＣＴＣ３ＴＡ???９０?§００?６１０?§２０?§３０?｜６４０?ＣＣＧＡＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＴＧＡＡＧＡＡＣＣＧＴＧＴＴＣＣＴＴＣＧＣＧＡＣＣＴＡＣＪｌｉＣＧＣＡＧＣＣＧＣＣＧＴＡＧＧ６９０?７００?７１０?２？?７３０?７４０ＣＣＣ３ＧＴＴＴＴＴＧＴＴＧＡＡ３ＴＧＴＡＡＴＴＣＡＣＴＴ３ＡＴＴＴＴＧＣＧＧＴＡＧ３ＡＣＧＣＣＣＧＧＴＣＧＡ３ＴＣＧ?．７９０?．８００?‘８１０?‘８２０?８３０?８４０ＡＴＡ３ＣＧＧＡＧＴＧＡＣＡＧＧＡＣＧＡＣＡＧＡＡＧＴＧＣＴＡＡＴＴＣＴＣＧＴＧＴＣＴＧＧＡＡＡＣＡＡｒ７ＣＴ３ＣＡＣＮＯ?§９０?９００?９１０?９２０?９３０ＴＴＣＧＡＡＧＡＧＴＧＴＧＧＡＧＡＸＧＣＡＴＴＣＡＧＧＧＧＣＡＧＡＧＧＧＡＡＧＧＡＴＴＣＣＧＡＣＡＣＧＣＣＴＣＳＣＣＣ§８０?§９０?１０００?１０１０?１０２０?，１０３０ＣＧＴＣＡＡＴＡＣＡＡＧＧＣＡＧＣＡＣＧＣＧＴＧＴＴＴＧＴＣＴＣＣＴＧＴＧＡＧＧＴＧ３ＴＣＴＣＴＧＧＴＴＣＴＧＡＡＧＧ—１０７０?１０８０?１０９０?１１００?＿１１１０?１１２０ＧＧＣＴ３ＣＣＡＡＣＴＡＣＴＧＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＧＴＧＴＣＴＡＴＧＣＧＧＡ．ＧＧＧＧＣ３ＣＣＡＴＧＡＧＧＣＴＴＴｒＣＡＣ????Ｖ１７０?１１８０?１１９０?１２００?Ｊ２１０?．１２２０ＴＣＴＴＴＴＧＣＣＧＴＴＧＣＧＧＡＣＡＴＧＴＴＴＣＡＴＣＧＴＡＧＧＡＴＣＧＡＧＧＣＡＧ３ＡＡＧＡＧ

形虫ＰＲＵ株ｒｏｐ５基因上游序列分割片；１：?０？０．５ｋｂ；?２：?０．５？ｌ．Ｏｋｂ；?３：?１．１?？１．５ｋｂ；?４：ＲＵ株基因上游序列ｒｏ／＞５－？／ｗ转录活性分弓形虫ＲＨ、ＰＲＵ株基因上游－２ｋｂ序列，，同ｐＲＬ载体一起转染２９３细胞，培养４８ｈ后加荧光值。??１５－．??１２－??〕９＿?＾??＾?６－?土丨圍??＾—：：■：—＝－??

【参考文献】：
期刊论文
[1]恶性疟原虫对青蒿素产生抗性的研究进展[J]. 张逸龙,潘卫庆.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2015(06)
[2]弓形虫入侵宿主机制及免疫学研究进展[J]. 蒲元华,张德林.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2012(06)
[3]刚地弓形虫免疫逃避相关分子的研究进展[J]. 郑斌,陆绍红.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2012(05)
[4]中国人群弓形虫病的流行特征分析[J]. 刘敏,陈晓光.  寄生虫与医学昆虫学报. 2010 (03)



本文编号：3105474