CXXC5表达变化对MLFs分化及CD40/CD40L通路的影响

发布时间：2021-04-06 19:30

　　目的:调节CXXC5的表达,明确CXXC5对小鼠肺成纤维细胞（MLFs）的增殖、凋亡作用,以及CXXC5对MLFs分化及CD40/CD40L通路的影响。加入TGF-β1刺激后,调节CXXC5的表达,明确CXXC5及TGF-β1对MLFs分化及CD40/CD40L信号通路的共同作用。方法:构建腺病毒表达载体:只含荧光蛋白的腺病毒载体（Ad-GFP）、带有目的基因CXXC5的荧光蛋白腺病毒载体（Ad-CXXC5）、靶向CXXC5的特异性shRNA腺病毒载体（Ad-shR-CXXC5）。将实验分为8个小组,组织贴壁法培养MLFs,用腺病毒感染各组对数生长期的细胞,探索最佳MOI值。CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖率、凋亡率。ELISA检测各组细胞培养上清液中Col1aI,Col1aIII,s CD40L的表达。RT-qPCR及Western Bot检测各组细胞CXXC5,proCol1aI,proCol1aIII,α-SMA,CD40,CD40L mRNA及蛋白的表达。结果:48小时三种病毒感染MLFs的最佳MOI值均为100。CXXC5表达上调后,与对照组相比,细胞的增殖活性减低（P&... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

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标准品配置

图 3 CXXC5 过表达质粒测序图 3：对构建的 CXXC5 过表达质粒进行测序，将测序结果与 CXXC5 基因片段进行对比，证实构建的质粒正确。上方为碱基序列，下方红、黑、绿、蓝测序峰分别代表 T、G、A、C 碱基。（2）CXXC5过表达质粒构图。CXXC5

1.1 CXXC5 过表达质粒测序及构图。（1）CXXC5 过表达质粒测序结果图 3 CXXC5 过表达质粒测序图 3：对构建的 CXXC5 过表达质粒进行测序，将测序结果与 CXXC5 基因片段进建的质粒正确。上方为碱基序列，下方红、黑、绿、蓝测序峰分别代表 T、G、（2）CXXC5过表达质粒构图。


本文编号：3122000