甲型流感H5/H7/H9及N2/N6/N9亚型非翻译区随机突变基因库构建及筛选

发布时间：2021-04-20 05:37

　　目的通过生物信息学方法分析甲型流感病毒H5/H7/H9及N2/N6/N9基因非翻译区（UTR）多态性位点,利用自主改造的RNA聚合酶Ⅰ荧光报告系统为骨架,构建含有H5/H7/H9及N2/N6/N9-UTR随机突变位点的随机突变基因库。从HA/NA-UTR随机突变库中挑选突变株,定性及定量地分析目报告基因表达情况,以此探究UTR多态性位点突变对甲型流感病毒HA/NA基因表达影响。方法1.流感病毒HA/NA基因UTR序列特征分析;2.RNA聚合酶I荧光报告系统的改造;3.H5/H7H9及N2/N6/N9-UTR随机突变基因库构建;4.报告基因上调筛选及鉴定。结果1.系统地分析深圳市及全球H5/H7/H9及N2/N6/N9-UTR序列特征,归纳出UTR序列突变位点特征;2.改造的RNA聚合酶I系统有效驱动报告基因EGFP表达,能以此用作UTR突变的功能性研究;3.成功构建H5/H7/H9及N2/N6/N9-UTR基因突变库,突变库容量达建库要求;4.经检验,实验组H7-10/H9-1/N2-5-UTR突变能显著上调报告基因表达。结论经改造获得不含任何外源性RNA启动子的RNA聚合酶I荧光报告... 

【文章来源】：第九届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文集中国微生物学会临床微生物学专业委员会会议论文集

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本文编号：3149081