骨髓间充质干细胞源外泌体对软骨细胞迁移、增殖和凋亡的影响

发布时间：2021-10-31 16:13

　　目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）分泌的外泌体（BMSC-Exo）对原代软骨细胞迁移、增殖和凋亡的影响。方法超速离心结合超滤浓缩法提取BMSC-Exo,通过透射电镜和Western blot法鉴定外泌体。分别使用浓度为25、50和100μg/ml的BMSC-Exo处理软骨细胞,划痕实验检测软骨细胞的迁移,CCK-8法检测软骨细胞的增殖,流式细胞术检测软骨细胞的凋亡。为模拟骨关节炎（OA）病理状态,同时设置IL-1β（10ng/ml）对照组。结果与细胞培养基对照组比较,BMSCExo作用使软骨细胞的划痕愈合率显著升高（12h,P <0. 05; 24h,P <0. 01）,细胞增殖速度明显加快（P <0. 01）,细胞凋亡比例显著降低（P <0. 01）,且均存在时间和剂量依赖性。IL-1β刺激可抑制软骨细胞的迁移和增殖,促进软骨细胞的凋亡,而BMSCExo可显著削减IL-1β的作用效果。结论 BMSC-Exo可促进软骨细胞的迁移运动和增殖能力,抑制软骨细胞发生凋亡,可对软骨细胞的生长发挥重要的调控作用。 

【文章来源】：医学研究杂志. 2020,49(01)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

大鼠BMSCs的成骨、成脂诱导分化

大鼠BMSC-Exo的鉴定

MSC属多功能干细胞，存在于骨髓、脂肪等多种组织，具有促生长、抗凋亡、抗炎和免疫抑制等功能，并有来源广、易获取、多向分化等特性，广泛应用于再生细胞治疗领域，特别是OA这种退行性疾病[2]。自20世纪90年代起，大量的临床研究证实直接关节腔内注射MSCs或将含有MSC的材料植入体内，均可有效治疗轻度至中度OA的软骨缺损，产生透明样软骨，减轻患者疼痛，提高生活质量[2～12]。尽管应用MSC治疗OA具有损伤小、见效快、疗效好等优点，但该方法花费巨大且存在医学伦理学争议、患者体重限制、有恶性转化风险等诸多限制因素，使得其临床应用受到局限。近年来，大量研究证实MSC的治疗效果主要来自于其旁分泌功能[2～4]。Exosome是一种重要的细胞旁分泌效应成分，属于细胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)的一种，经由内体途径产生，几乎所有细胞都可分泌[13]。Exosome直径30～100nm，由磷脂双分子层和其内包裹的脂类、蛋白质、核酸等生物信息物质构成，在细胞间信息传递中发挥重要作用[13]。研究证实，MSC-Exo具有与其来源亲本干细胞类似的功能[4,13]，在心肌梗死以及脑、肺、肝脏和急性肾损伤等疾病的动物模型中均可发挥良好的损伤修复效果[5,13]。最新研究结果显示，基于MSC-Exo的抗炎和促生长作用，其可促进OA关节软骨再生，但相关机制尚有待于深入研究[6～9]。软骨细胞是关节软骨内唯一的细胞成分，目前有关MSC-Exo对软骨细胞作用效果的研究较少。


本文编号：3468448