抗心肌Na + /Ca 2+ 交换体α-1 138-177 和α-2 840-877 多克隆抗体的制备及其功能研究

发布时间：2021-12-22 05:30

　　目的:在制备抗心肌Na⁺/Ca²⁺交换体α-1_{（138-177）}和α-2_{（840-877）}两种多克隆抗体的基础上,分别观察它们对大鼠心肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换体、L型钙通道、瞬时外向钾通道和内向整流钾通道电流的影响。方法:1.抗体制备和纯化:用化学合成的Na⁺/Ca²⁺交换体α-1_{（138-177）}和α-2_{（840-877）}短肽对新西兰大耳白兔进行主动免疫获取抗血清,间接ELISA法检测免疫后抗血清效价,用Protein A层析柱对抗体进行亲和纯化。2.膜片钳全细胞记录:应用膜片钳全细胞记录模式观察抗心肌Na⁺/Ca²⁺交换体α-1_{（138-177）}和α-2_{（840-877）}两种多克隆抗体分别对心肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换电流、L型钙电流... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

α-1抗体纯度的SDS-PAGE检测1.蛋白marker；2.ProteinA纯化后抗体：在变性条件下，抗体解离为重链（50kD）和轻链（25kD）两条带

4讨 论人工合成的 α-1 和 α-2 肽段为抗原，分别主动免疫新西兰大耳白备并获得了高浓度、高效价的 α-1 和 α-2 抗体，为下一步对其 SDS-PAGE 检测 1.蛋白 marker；2. ProteinA 纯化后抗体：在变性条件下，抗体解离

大鼠心肌细胞 L 型钙电流（ICa-L） 的抑制作用 a.对照； b、c 分别为加入 α-l 抗体 10 型钙电流（ICa-L）曲线；d. 细胞外液洗脱。大鼠心肌细胞 L 型钙电流（ICa-L）的作用 L 型钙电流测定方法40-877）抗体对 L 型钙电流也具有抑制作用。在 1-104nmol/L 浓度范型钙电流从给药前的（29.83±6.97）分别降至（25.98±3.33）、（25、（24.62±8.33）、（16.80±5.71）（p<0.01）pA/pF（表 2.4，图 2.4）表 2.4 α-2 抗体对大鼠心肌细胞 L 型钙电流的作用（ x ±s）体（nmol /L） n 电流密度（pA/p0 11 29.83±6.971 6 25.98±3.3310 6 25.76±4.43

【参考文献】：
期刊论文
[1]温度和胞内钠、ATP及酸碱度对心室肌细胞钠钙交换电流的调节[J]. 周红义,韩重阳,王晓良.  生理学报. 2006(02)
[2]抗钠-钙交换体α-1和α-2重复序列抗体的制备和纯化（英文）[J]. 封启龙,范国权,赵嘉惠,赵画晨,吴博威.  山西医科大学学报. 2005(04)



本文编号：3545845