BCR-ABL-SEA DNA疫苗诱导BALB/c小鼠特异性免疫应答的研究
发布时间：2021-12-28 14:54
目的：了解BCR-ABL-SEA双表达DNA疫苗诱导BALB/c小鼠特异性细胞和体液免疫应答效应,为进一步开发慢性粒细胞白血病（CML）疫苗提供可行性研究资料；研究金黄色葡萄球菌肠毒素A （SEA）对K562细胞体外诱导正常人脐带血单个核细胞CD3ζ链基因表达情况,并进一步探讨SEA增强K562细胞诱导活化T细胞的机制。方法：1.用成功构建的重组双表达BCR-ABL多肽和SEA多肽质粒BCR-ABL-pIRES-SEA（B-P-S）免疫BALB/c小鼠,间隔14d共3次。相同方法用单表达BCR-ABL多肽或SEA多肽的质粒BCR-ABL-pIRES和SEA-pIRES免疫小鼠做对照。利用CCK-8比色法检测诱导后小鼠脾脏T细胞对K562细胞株杀伤活性；流式细胞术测定小鼠脾脏CD4+与CD8+T细胞表达情况；ELISA法检测小鼠血清中IFN-γ、IL-4生成情况；间接免疫荧光法检测血清中抗BCR-ABL抗体；并进一步分离小鼠注射部位肌肉,用RT-PCR及免疫组织化学染色法检测目的基因在小鼠骨骼肌中的转录和表达。2.常规分离4例脐带血单个核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体、单纯K562细胞、...
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BCR一ABL融合基因示意图
图2DNA疫苗激发机体细胞和体液免疫原理由于DNA疫苗能够同时诱导体液和细胞免疫，而且具备传统疫苗无法比拟的诸多优点，因此在常规化疗结束后辅以特异的DNA疫苗是希望有效清除MRD的方法之一。在白血病患者细胞，多存在由于染色体易位形成的BCR一ABL融合基因，融合蛋白中存在的独特氨基酸序列可作为肿瘤特异性抗原，具有潜在的免疫原性，可以成为诱导产生特异性免疫应答的靶点，基于融合基因设计的DNA疫苗为白血病的治疗带来新的希望[23】。Padua等将PML一RAR。融合基因(105bp)与破伤风毒素C片段(Frc)融合，设计出一种针对小鼠早幼粒细胞白血病模型DNA疫苗，最早证实了以融合蛋白为特异性靶点DNA疫苗可以强烈诱导体内细胞和体液免疫效应，显著提高患病动物的生存率，同时体内出现时间依赖性的中和抗体和IFN一Y增加，这一实验就提示APL细胞表达的PML一RARa蛋白能作为肿瘤相关性抗原增强体内免疫反应效应，诱导产生特异性免疫反应而发挥抗白血病效应，延长动物
SEA激活T细胞通路机制现在研究比较多超抗原是葡萄球菌肠毒素(staphyloceucalenterotoxins，ses)
【参考文献】：
期刊论文
[1]Specific cellular immune responses in mice immunized with DNA,adeno-associated virus and adenoviral vaccines of Epstein-Barr virus-LMP2 alone or in combination[J]. WANG Zhan 1,YANG SongMei 1,ZHOU Ling 1,DU HaiJun 1,MO WuNing 2 & ZENG Yi 1 1 State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control,Institute for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 100052,China;2 Laboratory Department,The First Affiliated Hospital,Guangxi Medical University,Nanning 530021,China. Science China（Life Sciences）. 2011(03)
[2]BCR-ABL-SEA DNA疫苗诱导BALB/c小鼠的免疫应答[J]. 高永鹏,林晨,田红霞,陈琛,秦雅楠,周羽竝,李扬秋. 中国病理生理杂志. 2011(02)
[3]超抗原SEA对K562细胞诱导脐带血单个核细胞上CD3ε链表达的影响[J]. 田红霞,高永鹏,林晨,陈少华,杨力建,李扬秋. 细胞与分子免疫学杂志. 2010(12)
[4]SEA联合K562细胞体外诱导正常人脐带血单核细胞TCRζ链表达的作用[J]. 高永鹏,林晨,田红霞,高珂,郜世隽,江振友,陈少华,沈琦,李扬秋. 暨南大学学报(自然科学与医学版). 2010(02)
[5]SHIP基因诱导白血病细胞株K562凋亡及其机制[J]. 杨琳,罗建民,刘小军,温树鹏,杜行严,姚丽,杨敬慈. 生理学报. 2009(02)
[6]超抗原SEA增强PML-RARα多肽体外诱导特异性CTL杀伤活性的机制[J]. 林晨,白雪,高珂,杨力建,陈少华,李扬秋. 肿瘤防治研究. 2008(09)
[7]超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响[J]. 林晨,高珂,白雪,陈少华,杨力建,李扬秋. 免疫学杂志. 2008(05)
[8]bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病样模型的建立[J]. 张文萍,冯文莉,黄世峰,史梦,王雅珍,曾建明,李惠,温健萍,陈新敏,曹唯希,黄宗干. 第四军医大学学报. 2008(15)
[9]PML-RARα-hIL-2 DNA疫苗诱导BALB／c小鼠的细胞和体液免疫应答[J]. 杨力建,岑东芝,周羽竝,胡刚,陈少华,李扬秋. 癌症进展. 2008(04)
[10]肿瘤过继性免疫细胞治疗的研究进展[J]. 史蓉华,赵树铭. 重庆医学. 2007(24)
博士论文
[1]DNA疫苗载体优化设计和新型佐剂的研究[D]. 孙静.中国协和医科大学 2009
[2]SHIP基因在慢性粒细胞白血病发病中的作用及机制探讨[D]. 刘小军.河北医科大学 2009
本文编号：3554255
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BCR一ABL融合基因示意图
图2DNA疫苗激发机体细胞和体液免疫原理由于DNA疫苗能够同时诱导体液和细胞免疫，而且具备传统疫苗无法比拟的诸多优点，因此在常规化疗结束后辅以特异的DNA疫苗是希望有效清除MRD的方法之一。在白血病患者细胞，多存在由于染色体易位形成的BCR一ABL融合基因，融合蛋白中存在的独特氨基酸序列可作为肿瘤特异性抗原，具有潜在的免疫原性，可以成为诱导产生特异性免疫应答的靶点，基于融合基因设计的DNA疫苗为白血病的治疗带来新的希望[23】。Padua等将PML一RAR。融合基因(105bp)与破伤风毒素C片段(Frc)融合，设计出一种针对小鼠早幼粒细胞白血病模型DNA疫苗，最早证实了以融合蛋白为特异性靶点DNA疫苗可以强烈诱导体内细胞和体液免疫效应，显著提高患病动物的生存率，同时体内出现时间依赖性的中和抗体和IFN一Y增加，这一实验就提示APL细胞表达的PML一RARa蛋白能作为肿瘤相关性抗原增强体内免疫反应效应，诱导产生特异性免疫反应而发挥抗白血病效应，延长动物
SEA激活T细胞通路机制现在研究比较多超抗原是葡萄球菌肠毒素(staphyloceucalenterotoxins，ses)
【参考文献】：
期刊论文
[1]Specific cellular immune responses in mice immunized with DNA,adeno-associated virus and adenoviral vaccines of Epstein-Barr virus-LMP2 alone or in combination[J]. WANG Zhan 1,YANG SongMei 1,ZHOU Ling 1,DU HaiJun 1,MO WuNing 2 & ZENG Yi 1 1 State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control,Institute for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 100052,China;2 Laboratory Department,The First Affiliated Hospital,Guangxi Medical University,Nanning 530021,China. Science China（Life Sciences）. 2011(03)
[2]BCR-ABL-SEA DNA疫苗诱导BALB/c小鼠的免疫应答[J]. 高永鹏,林晨,田红霞,陈琛,秦雅楠,周羽竝,李扬秋. 中国病理生理杂志. 2011(02)
[3]超抗原SEA对K562细胞诱导脐带血单个核细胞上CD3ε链表达的影响[J]. 田红霞,高永鹏,林晨,陈少华,杨力建,李扬秋. 细胞与分子免疫学杂志. 2010(12)
[4]SEA联合K562细胞体外诱导正常人脐带血单核细胞TCRζ链表达的作用[J]. 高永鹏,林晨,田红霞,高珂,郜世隽,江振友,陈少华,沈琦,李扬秋. 暨南大学学报(自然科学与医学版). 2010(02)
[5]SHIP基因诱导白血病细胞株K562凋亡及其机制[J]. 杨琳,罗建民,刘小军,温树鹏,杜行严,姚丽,杨敬慈. 生理学报. 2009(02)
[6]超抗原SEA增强PML-RARα多肽体外诱导特异性CTL杀伤活性的机制[J]. 林晨,白雪,高珂,杨力建,陈少华,李扬秋. 肿瘤防治研究. 2008(09)
[7]超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响[J]. 林晨,高珂,白雪,陈少华,杨力建,李扬秋. 免疫学杂志. 2008(05)
[8]bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病样模型的建立[J]. 张文萍,冯文莉,黄世峰,史梦,王雅珍,曾建明,李惠,温健萍,陈新敏,曹唯希,黄宗干. 第四军医大学学报. 2008(15)
[9]PML-RARα-hIL-2 DNA疫苗诱导BALB／c小鼠的细胞和体液免疫应答[J]. 杨力建,岑东芝,周羽竝,胡刚,陈少华,李扬秋. 癌症进展. 2008(04)
[10]肿瘤过继性免疫细胞治疗的研究进展[J]. 史蓉华,赵树铭. 重庆医学. 2007(24)
博士论文
[1]DNA疫苗载体优化设计和新型佐剂的研究[D]. 孙静.中国协和医科大学 2009
[2]SHIP基因在慢性粒细胞白血病发病中的作用及机制探讨[D]. 刘小军.河北医科大学 2009
本文编号：3554255
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