铜绿假单胞菌调节蛋白VqsR、Arr及T3SS系统转运蛋白PopB/D的结构与功能研究

发布时间：2022-01-22 06:48

　　铜绿假单胞菌是一种十分常见的条件性致病菌,当身体存在伤口或者免疫力比较低的时候,它才会感染和致病,而且非常难以除去,产生慢性感染最终可能导致死亡。因为它容易感染伤口,因此是医院手术和一些治疗后感染的一个主要来源,并常存在于患有囊性纤维化个体中引起肺部感染。群体效应是细胞间的一种交流,可以使细菌根据细胞的浓度来调节基因的表达。群体效应途径中包含大量的调节子,这些调节子可以控制很多毒性因子的表达,使得病原体能够适应各种环境,抵抗各种治疗方式。在铜绿假单胞菌中有las和rhl两个主要的群体效应系统,并且las系统会正向调节rhl系统,形成层级的调控网络。细菌虽然是一个个结构比较简单的个体,但通常它们不会单独生存,大部分的都是聚集在一起相互影响共同生存,其中一种常见的存在方式就是生物膜。形成生物膜后,菌落对抗生素等药物的抵抗能力会明显的增强。环二鸟苷酸（C-di-GMP）是各种调控的一个第二信使小分子,在细菌中存在广泛,其中一个方面就是可以调节生物膜的形成。主要由鸟苷酸环化酶（DGC）和磷酸二酯酶（PDE）催化它的合成和分解,其中EAL domain是分解C-di-GMP的一种PDE酶,可以将... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号说明
第1章 前言
    1.1 铜绿假单胞菌
        1.1.1 铜绿假单胞菌的介绍
        1.1.2 群体效应
        1.1.3 生物膜
    1.2 第二信使C-di-GMP
    1.3 T3SS分泌系统
    1.4 课题研究主要内容
第2章 蛋白质VqsR的结构与功能研究
    2.1 蛋白质VqsR
    2.2 实验材料
        2.2.1 菌种和质粒载体
        2.2.2 常用工具酶和试剂
        2.2.3 配制试剂
        2.2.4 实验仪器设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 蛋白质VqsR的相关克隆
        2.3.2 蛋白质表达纯化
        2.3.3 蛋白质的结晶和优化
        2.3.4 蛋白质晶体的衍射和数据收集
    2.4 实验结果
        2.4.1 VqsR全长的实验结果
        2.4.2 VqsR1-193的实验结果
        2.4.3 VqsR的其他实验结果
    2.5 本章小结
第3章 膜蛋白Arr的结构与功能研究
    3.1 膜蛋白Arr
    3.2 实验方法
        3.2.1 膜蛋白Arr的相关克隆
        3.2.2 膜蛋白Arr的表达纯化
        3.2.3 膜蛋白Arr和EAL domain的结晶
        3.2.4 膜蛋白Arr和EAL domain的酶活实验
        3.2.5 膜蛋白Arr和EAL domain的其他实验
    3.3. 实验结果
        3.3.1 膜蛋白Arr全长的实验结果
        3.3.2 EAL domain的实验结果
        3.3.3 膜蛋白Arr周质空间结构域实验结果
        3.3.4 膜蛋白Arr的其他实验结果
    3.4 本章小结
第4章 膜蛋白PopB/D的结构与功能研究
    4.1 膜蛋白PopB和PopD
    4.2 实验方法
    4.3 实验结果
        4.3.1 膜蛋白PopD的实验结果
        4.3.2 膜蛋白PopB的实验结果
    4.4 本章小结
全文总结
参考文献
致谢
学化论文评阁及答辩情况表



本文编号：3601734