Skp2 G72S/G72S 基因敲入小鼠模型的建立及表型分析

发布时间：2022-02-08 21:17

　　细胞内蛋白质的降解途径主要为溶酶体途径和泛素蛋白酶体途径。泛素蛋白酶体系统包括泛素激活酶（E1）、泛素结合酶（E2）和泛素连接酶（E3）等。泛素化过程中的底物特异性主要由E3连接酶控制。目前已知约有600个E3连接酶,按蛋白质序列同源性特征主要分为三个家族:HECT家族,RING finger家族和RBR家族。在RING类泛素E3连接酶中,SCF复合物受到广泛关注。SCF复合物由支架蛋白Cullin1,RING finger蛋白Rbx1/2,接头蛋白Skp1（S期激酶相关蛋白1）和F-box蛋白组成。F-box蛋白被划分为三个亚家族:FBXW、FBXL和FBXO亚家族。这些F-box蛋白靶向范围广泛的蛋白底物,并参与调节如细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡、血管生成和转移等细胞过程。Skp2属于FBXL家族,是目前研究最为广泛的F-box蛋白之一。Skp2在Ser64和Ser72残基处被Cdk2和Akt磷酸化,可以防止Cdh1与Skp2的结合,从而减弱Skp2泛素化和降解,促进Skp2稳定,触发SCF复合物形成及E3酶活,并且介导Skp2向胞质定位,促进细胞迁移和增殖。Skp2在小鼠中的过度... 

【文章来源】：军事科学院北京市

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Skp2蛋白结构示意图

哺乳动物Skp2的NLS段DNA序列信息

图 3.1.2 Skp2G72S/G72S基因敲入小鼠打靶策略 Skp2-G72S 突变只有一个碱基的变化，用基因测序的方法能准确鼠的基因型。其中，Skp2WT/WT小鼠 Skp2 第 72 位是甘氨酸，密码C；Skp2G72S/G72S小鼠 Skp2 第 72 位突变为丝氨酸，密码子为 AGC；有两种密码子，测序结果在 72 位点显示有双峰。这样就能鉴定出小鼠（图 3.1.3）。


本文编号：3615765