oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进A7r5细胞钙化及炎症因子表达

发布时间：2025-02-08 10:25

　　 目的探讨氧化低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对大鼠血管平滑肌A7r5细胞钙化、炎症因子表达的影响以及Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法分别用oxLDL、 oxLDL/β2GPI复合物、β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、 oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物干预刺激大鼠A7r5细胞系不同时间,采用或不采用TLR4抑制剂TAK-242处理。茜素红染色观察细胞钙化结节,实时荧光定量PCR和Western blot法检测平滑肌蛋白22α(SM22α)和RUNX家族转录因子2(RUNX2)的mRNA和蛋白水平, ELISA检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平; A7r5细胞给予TNF-α刺激后,进一步检测SM22α和RUNX2 mRNA和蛋白水平的变化。结果 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够促进A7r5细胞钙化结节增多, SM22α表达减少而RUNX2明显上升,促进炎症因子TNF-α的表达, TLR4抑制剂能够缓解这一现象;外加不同浓度的T...

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【部分图文】：

图1 A7r5细胞钙化情况(茜素红染色, ×100)

不同处理组培养12d后进行茜素红染色,与对照组相比,阳性对照2.6mmol/L高磷组可见明显深色钙化结节,说明钙化模型建立成功(图1～8,红色箭头)。各处理均出现了钙化颗粒,但其中oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物处理组可见明显多个钙化结节(图1),加....

图2 不同刺激对A7r5细胞SM22α、 RUNX2表达的影响

与培养基对照组相比,不同干预均能使TNF-α表达提高,但其中oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物处理组TNF-α的表达增高最为明显(P<0.01,图4)。图3TAK-242处理后不同干预刺激对A7r5细胞SM22α和RUNX2表达影响

图3 TAK-242处理后不同干预刺激对A7r5细胞SM22α和RUNX2表达影响

图2不同刺激对A7r5细胞SM22α、RUNX2表达的影响图4不同处理对A7r5细胞TNF-α水平的影响

图4 不同处理对A7r5 细胞TNF-α水平的影响

图3TAK-242处理后不同干预刺激对A7r5细胞SM22α和RUNX2表达影响2.4TNF-α呈剂量依赖性导致A7r5细胞发生成骨样表型改变

本文编号：4031379