LHA-DVC Orexin-A通路构成及对胃牵张敏感神经元放电活动和胃运动调控研究

发布时间：2017-07-29 14:24

  本文关键词：LHA-DVC Orexin-A通路构成及对胃牵张敏感神经元放电活动和胃运动调控研究

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【摘要】：目的:Orexin-A作为一种新型神经肽,具有广泛的生理作用,可调节摄食、能量代谢、睡眠-觉醒及胃肠运动等生理活动,但orexin-A对胃运动调控机制还未明确。本实验拟通过观察orexin-A对大鼠迷走神经复合体(DVC)胃牵张敏感神经元(GD)放电活动的影响,以及下丘脑外侧区(LHA)对其调控作用,并通过逆行追踪结合免疫组化实验进一步阐述LHA-DVC间可能存在orexin-A神经及功能通路。方法:逆行追踪技术结合荧光免疫组化染色,观察LHA-DVC间orexin-A神经通路的构成;采用细胞外放电记录,观察DVC微量注射orexin-A对GD放电活动的影响及可能机制;通过在体胃运动研究,观察DVC微量注射orexin-A对清醒自由活动大鼠胃收缩幅度和频率的影响,以及对大鼠胃液及胃酸分泌的影响及机制。结果:逆行追踪结合免疫荧光染色研究发现,LHA内有orexin-A/荧光金(FG)双标神经元;电生理实验显示,DVC内共记录到96个GD敏感神经元,其中58个为GD-E神经元,38个为GD-I神经元。DVC微量注射orexin-A,有36个GD-E神经元放电频率明显增强(P0.01),而24个GD-I神经元放电频率明显减弱(P0.01);大鼠DVC内预先微量注射orexin-A选择性受体拮抗剂SB334867,orexin-A对GD-E神经元放电兴奋效应可被完全阻断(P0.05),同样,对GD-I神经元放电抑制效应也可被完全阻断(P0.05)。电刺激LHA,在DVC记录到的36个orexin-A敏感性GD-E神经元中有24个放电频率显著增加(P0.05);而24个orexin-A敏感性GD-I神经元中16个放电频率也增加(P0.05)。但预先DVC内注射SB334867,再电刺激LHA,GD-E神经元放电频率较前明显下降(P0.01),GD-I神经元放电频率也显著降低(P0.05)。在体胃运动研究结果显示,DVC微量注射orexin-A,大鼠胃收缩幅度以及收缩频率明显升高,且呈明显剂量依赖关系(P0.05)。SB334867可显著阻断orexin-A对促胃运动效应(P0.05)。电刺激LHA,大鼠胃运动显著增强(P0.01);DVC微量注射orexin-A,大鼠胃液及胃酸分泌且呈剂量依赖性增加(P0.05)。结论:Orexin-A可影响大鼠胃牵张敏感神经元放电活动,以及胃运动和胃酸分泌,该效应可能通过Orexin-A受体通路调控。
【关键词】：orexin-A 胃牵张敏感神经元 LHA DVC 胃运动
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-8
• 第一章 材料与方法8-15
• 1.1 实验材料8-10
• 1.1.1 实验动物8
• 1.1.2 实验仪器8
• 1.1.3 实验药品8-9
• 1.1.4 试剂配制9-10
• 1.2 实验方法10-14
• 1.2.1 逆行追踪实验10-12
• 1.2.2 电生理实验12-13
• 1.2.3 胃运动实验13-14
• 1.2.4 胃液及胃酸实验14
• 1.2.5 电刺激LHA14
• 1.2.6 组织学检查14
• 1.3 统计学分析14-15
• 第二章 实验结果15-26
• 2.1 下丘脑外侧区-迷走神经复合体orexin-A神经纤维投射15
• 2.2 DVC微量注射orexin-A对GD神经元放电活动的影响15-17
• 2.3 电刺激LHA对DVC orexin-A敏感性GD神经元放电活动的影响17-19
• 2.4 DVC微量注射orexin-A对大鼠胃运动的影响19-21
• 2.5 DVC微量注射SB334867对电刺激LHA诱导的胃运动的影响21-24
• 2.6 DVC微量注射orexin-A对大鼠胃液及胃酸分泌的影响24-26
• 第三章 讨论26-28
• 结论28-29
• 参考文献29-33
• 综述33-59
• 参考文献45-59
• 致谢59-60
• 攻读学位期间研究成果60-61

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本文编号：589603