大鼠ASC体外分离培养、鉴定及其双报告基因标记示踪

发布时间：2017-08-09 07:35

本文关键词：大鼠ASC体外分离培养、鉴定及其双报告基因标记示踪

【摘要】：[目的]探索ASC高效分离方法,采用荧光基因标记法对分离的ASC进行标记、功能检测和示踪研究。[方法]通过优化脂肪组织的酶解消化条件,分别采用胶原酶、胰蛋白酶及组合对脂肪组织消化,检测细胞产量,并用流式细胞术进行鉴定。之后利用GFP-Fluc双报告基因对体外分离培养的ASC进行标记,鉴定其多项分化潜能。[结果]胶原酶、胰蛋白酶复合酶消化能够显著提高ASC分离效率,细胞产量较单一酶消化提高4~5倍。体外扩增培养ASC以表达CD29、CD90等为主。GFP-Fluc基因标记后的ASCs具有成脂肪、成骨分化潜能,可用于活体干细胞移植后的定量追踪。[结论]胶原酶、胰蛋白酶复合酶解法可以显著提高脂肪干细胞的原代分离效率4~5倍。
【作者单位】：黑龙江中医药大学佳木斯学院;佳木斯市第十九中学;黑龙江中医药大学药学院;
【关键词】： 脂肪来源的干细胞(ASC) 组织工程与再生医学 生物发光 复合酶解法
【基金】：黑龙江省中医管理局科研项目(“二妙散对银屑病样小鼠的治疗作用及机制研究”,No.zhy12_w016)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 脂肪来源干细胞(ASC)已被证实在组织修复与再生中有着广阔的应用前景和治疗潜能[1]。在临床治疗应用中,尽管所需要ASC细胞数量可以通过大量的抽取脂肪组织或体外长期扩增来获得,然而大量的抽脂同样会伴随较大的侵袭性;不仅如此,ASC体外的长期培养会增加ADSC基因型突变以及致瘤

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