不同方法对苦瓜核糖体失活蛋白的PEG化学修饰后蛋白浓度测定的差异

发布时间：2017-08-14 01:31

  本文关键词：不同方法对苦瓜核糖体失活蛋白的PEG化学修饰后蛋白浓度测定的差异

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【摘要】：目的探究PEG化学修饰对4种常用蛋白浓度测定方法的影响。方法采用福林-酚试剂法(Lowry法)、二喹啉甲酸法(BCA法)、考马斯亮蓝法(Bradford法)和紫外分光光度法(UV法)分别测定样品中α-苦瓜素和抗人类免疫缺陷病毒植物蛋白MAP30经PEG修饰前、后的蛋白含量;并用Lowry法和BCA法对低浓度游离PEG修饰前、后的样品蛋白含量进行测定。结果发现考马斯亮蓝不与样品发生颜色反应,PEG修饰后会使UV法测定值变大,Lowry法测定值略有变大,BCA法基本不受影响;低浓度的游离PEG对测定方法无影响,但高浓度的PEG会吸附Folin-酚,形成黄色絮状物。结论 PEG化学修饰对蛋白浓度测定方法影响最小的为BCA法,Lowry法最灵敏,Bradford法不适用;而PEG化学修饰会使UV法测定值增大20%~30%,可作为快速测定时的校准参考。
【作者单位】： 成都医学院检验医学院;
【关键词】： PEG化学修饰 苦瓜籽 核糖体失活蛋白 蛋白浓度测定
【基金】：国家大学生创新创业训练计划项目(No:201413705019) 四川省大学生创新创业训练计划项目(No:201613705026)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： α-苦瓜素(Alpha-momorcharin,α-MMC)和抗人类免疫缺陷病毒植物蛋白MAP30(momordicaanti-HIV protein,MAP30)都是从苦瓜中提取分离得到的核糖体失活蛋白(ribosome inactive protein,RIP),目前已有多篇研究[1-3]报道,上述两种蛋白均有较强的抗病毒和抗肿瘤效果,特别是抗HIV作

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本文编号：670097