分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析

发布时间：2017-08-15 10:17

  本文关键词：分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析

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【摘要】：目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以E.coli的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以E.coli的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。
【作者单位】： 滨州医学院病原生物学教研室;
【关键词】： 幽门螺杆菌 尿素酶 Hsp 分子伴侣 相互作用
【基金】：国家自然科学基金青年基金项目(No.81501718) 山东省自然科学基金培养基金项目(No.ZR2015PC021、No.ZR2014CP020) 山东省高等学校科技计划项目(No.J13LK16) 滨州医学院科技计划项目(No.BY2014KJ01)
【分类号】：R378
【正文快照】： *?**?幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是目前所知的唯一一种能特异性寄居于人胃粘膜的病原菌,是胃肠道疾病的主要致病因素之一[1]。Hp产生的尿素酶是重要致病因子,由α、β两亚基构成。Hp对低pH十分敏感,但Hp分泌的尿素酶能水解尿素而释放氨,从而中和盐酸,使细菌能够顺利

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本文编号：677629