Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化液蛋白成分分析

发布时间：2017-08-18 11:20

  本文关键词：Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化液蛋白成分分析

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【摘要】：目的对本公司研发的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化液进行蛋白成分分析及鉴定。方法按照疫苗生产工艺,应用NBS篮式生物反应器生产单价脊髓灰质炎病毒原液,经超滤浓缩及分子筛和阴离子交换两步柱层析纯化方法,收集并灭活蛋白峰。透射电镜下观察病毒形态及大小;ELISA方法检测宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)及残留牛血清白蛋白含量;HPLC法分析单价灭活病毒纯化液纯度;液相色谱(liquid chromatography,LC)与电喷雾电离质谱(electrospray ionization-mass spectrometry,ESI-MS)相结合的技术鉴定样品中所含蛋白成分。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化液中可见球形病毒颗粒,直径25~30 nm;HCP、残余牛血清白蛋白含量分别低于50 ng/ml、2.5μg/ml;纯度大于95%;单价脊髓灰质炎病毒样品中含有相应血清型的脊髓灰质炎病毒基因组编码蛋白,且相应病毒蛋白成分数据库匹配相对分值在所含蛋白组分中均最高。结论Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒液经纯化后,有效去除了杂质蛋白保留了病毒蛋白组分,单价病毒纯化液病毒蛋白成分明确,纯度较高,为后续该疫苗的研发与生产提供了参考。
【作者单位】： 北京天坛生物制品股份有限公司;
【关键词】： 脊髓灰质炎病毒 纯化 蛋白成分
【基金】：国家科技部“重大新药创新”专项(2013ZX09402302)
【分类号】：R392
【正文快照】： 脊髓灰质炎(以下简称脊灰)是由脊灰病毒感染引起的、以肢体麻痹为主的急性肠道传染性疾病,儿童为主要易感人群。目前控制与消灭脊灰最重要的是接种有效的脊灰疫苗。国内外应用的脊灰疫苗有两种:口服脊灰减毒活疫苗(oral poliovirus vaccine, OPV)和灭活脊灰疫苗(inactivated

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2 孔健，徐爱强，董春明，刘萍，，迮文远;应用逆转录聚合酶链反应鉴定脊髓灰质炎病毒[J];中华医学杂志;1994年11期

3 丁昌慧,邵荣标,钱绩虎,严建国,汤权,刘玲,吴巨飞;外环境中脊髓灰质炎病毒分离的实验研究[J];疾病监测;2000年08期

4 丁昌慧,邵荣标,钱R慊

本文编号：694299