弓形虫表面抗原SAG1基因自杀性DNA疫苗的构建及免疫原性检测

发布时间：2017-08-21 08:14

  本文关键词：弓形虫表面抗原SAG1基因自杀性DNA疫苗的构建及免疫原性检测

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【摘要】：目的构建表达弓形虫表面抗原SAG1的自杀性DNA疫苗pDREP-SAG1并检测其免疫原性。方法以弓形虫RH株基因组DNA为模板,PCR扩增SAG1基因(GenBank No.HM776940.1),克隆至甲病毒复制子载体pDREP-eGFP中替换原有的eGFP基因,菌液PCR、双酶切及测序鉴定重组质粒。重组的自杀性DNA疫苗pDREP-SAG1经股四头肌注射并联合瞬时电穿孔免疫BALB/c小鼠,同时以原质粒pDREP-eGFP作为对照组,间隔3周后以相同条件再免疫1次,收集小鼠血清,以弓形虫裂解抗原Western blotting检测其诱导产生的特异性抗体。结果从弓形虫基因组中PCR扩增得到1 011bp长度的SAG1基因,成功构建重组质粒pDREP-SAG1。Western blotting结果显示,重组质粒免疫的小鼠血清能特异性地识别虫体抗原中的SAG1抗原。结论成功构建了弓形虫自杀性DNA疫苗pDREP-SAG1,能诱导小鼠产生特异性的抗体,具有免疫原性。
【作者单位】： 温州医科大学基础医学院寄生虫学教研室;温州医科大学口腔医学院/附属口腔医院;
【关键词】： 弓形虫 SAG 自杀性DNA疫苗
【基金】：浙江省科技厅公益技术研究社会发展项目(No.2014C33161) 温州市科技局公益项目(No.Y20140665) 浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划项目(No.2015R413061)联合资助~~
【分类号】：R382.5
【正文快照】： 浙江省科技厅公益技术研究社会发展项目(No.2014C33161)、温州市科技局公益项目(No.Y20140665)和浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划项目(No.2015R413061)联合资助刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种重要的机会性致病原虫,广泛寄生于人和多种动物的有核细胞内,可引

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本文编号：711775