基于pH值敏感的荧光染料分析腺病毒诱导T淋巴细胞胞内体膜的裂解

发布时间：2017-08-26 19:33

本文关键词：基于pH值敏感的荧光染料分析腺病毒诱导T淋巴细胞胞内体膜的裂解

【摘要】：【目的】探索基于pH值敏感的荧光染料分析腺病毒裂解T淋巴细胞胞内体膜的实验方法。【方法】本文以Jurkat细胞(T淋巴瘤细胞)为靶细胞,将pH值敏感的荧光染料pHrodo dextran与5型腺病毒(Ad5)共同孵育Jurkat细胞,对pHrodo dextran孵育的浓度与时间进行了优化,利用激光共聚焦显微镜分析胞内相对平均荧光强度百分比随时间的变化情况,反映Ad5诱导胞内体膜裂解情况。【结果】研究结果表明,在pHrodo dextran终浓度为80μg/m L,孵育时间为10 min条件下,在病毒感染后的30 min,相对平均荧光强度百分比出现显著下降;利用巴佛洛酶素A1抑制胞内体膜质子泵活性后,相对平均荧光强度百分比出现轻微下降。【结论】建立了基于pHrodo dextran分析腺病毒诱导T细胞胞内体膜裂解的新方法。
【作者单位】：广东药科大学生命科学与生物制药学院广东省生物技术候选药物研究重点实验室;东莞市人民医院;
【关键词】： 腺病毒 胞内体 胞内运输 T淋巴细胞
【基金】：国家自然科学基金(31400149,31300737) 广东省科技计划项目(2014A020212462) 广东省自然科学基金(2014A030313586)~~
【分类号】：R392
【正文快照】： T细胞的抗原识别特异性是由其表面的抗原识别受体(T cell receptor,TCR)所决定。体外分离并扩增来自病人的T细胞,利用转基因的方法将具有肿瘤抗原特异性识别的TCR基因转入此T细胞,将能够赋予T细胞抗肿瘤的能力;然后将此抗原特异性TCR基因修饰T细胞进行过继性移植/回输的疗法,

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