苦参碱下调模型鼠肺组织MMP-2、MMP-9的表达抗肺纤维化
本文关键词:苦参碱下调模型鼠肺组织MMP-2、MMP-9的表达抗肺纤维化
【摘要】:目的:观察苦参碱对肺纤维化大鼠肺组织中MMP-2、MMP-9的表达,探讨苦参碱抗肺纤维化的可能作用机制。方法:健康雄性SD大鼠60只,随机分为4组,每组15只。分别为生理盐水对照组(A组)、博来霉素组(B组)、博来霉素+苦参碱50mg处理组(C组)、博来霉素+苦参碱100mg处理组(D组)。B组、C组、D组均一次性气管内给博来霉素5mg/kg建肺纤维的动物模型;A组以同样的方法一次性气管内注入等体积的生理盐水;C组、D组分别在博来霉素给药后第一天开始以50mg/kg、100mg/kg苦参碱每日灌胃,而A组、B组每日以等体积的生理盐水灌胃。各组大鼠在造模7d、14d、28d随机处死5只取材,每次共20只。肺组织HE染色和Masson染色电镜观察肺组织切片的肺泡炎和肺纤维化改变;应用免疫组织化学技术(PV法)和RT-PCR法分别检测各组大鼠肺组织中MMP-2及MMP-9蛋白及m RNA的表达。结果:(1)肺组织HE染色及Masson染色可见A组大鼠肺组织肺泡结构完整,肺泡间隔无增宽,无间质炎症及纤维化改变。B组在第7天可见肺泡结构破坏,肺泡壁不同程度增厚,肺泡腔内大量炎性细胞浸润,并可见少数区域出现胶原沉积及纤维化形成;第14天正常的肺泡结构大量被破坏,肺泡腔内仍可见炎性细胞浸润,肺泡壁普遍增厚,胶原沉积及纤维化程度进一步加重;第28天肺泡炎症减轻,大量胶原沉积及纤维化形成,几乎无完整肺泡结构;C、D组肺泡炎和纤维化程度较B组各对应时间点均有不同程度的减轻,但仍较A组高。(2)免疫组化(PV法)和RT-PCR结果:A组MMP-2和MMP-9表达均较弱,MMP-2:B组各时间段MMP-2表达较A组均显著增加(P0.05),表达在第14天达高峰,C、D组两者的表达在各时间段均较模型组有不同程度减低(P0.05),且D组比C组降低更明显,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。MMP-9:B组7天、14天MMP-9表达较A组显著增加(P0.05),表达高峰在第7天,C、D组两者的表达在7天、14天均较模型组有不同程度减低(P0.05),且D组比C组降低更明显,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。在28天,MMP-9表达基本恢复正常,各组间比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:(1)苦参碱能够减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化程度。(2)苦参碱抗大鼠肺纤维化作用机制可能与下调MMP-2、MMP-9的表达有关。
【关键词】:苦参碱 肺纤维化 MMP-2 MMP-9
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R563
【目录】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 主要英文缩略语索引9-11
- 第1章 前言11-13
- 第2章 实验材料13-15
- 第3章 实验方法15-19
- 第4章 实验结果19-29
- 第5章 讨论29-33
- 第6章 结论33-35
- 参考文献35-39
- 文献综述 明胶酶与特发性肺纤维化39-47
- 参考文献43-47
- 硕士期间发表的论文47-49
- 致谢49
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本文编号:1030489
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